49 - 食品科学技术页

保温 60 min 后相对酶活性为 97郾 47% ,因此 ,B16 菌
代谢产生纤维素酶的温度稳定性较好. 当保温温度
超过 60 益 时, 纤维素酶的稳定性降低,70 益 保温后
相对酶活性为 75郾 2% ,90 益 保温 60 min 后酶活性只
有最大酶活的 22郾 34% .
2郾 4摇 最适反应 pH 值分析
初始反应 pH 值对酶活力影响见图 6.
图 6摇 酶活测定的 pH 值影响
Fig. 6摇 Relative activity of CMCase at different pH
B16 菌代谢产生纤维素酶的最适反应 pH 值为
8郾 0, 偏碱性. 该酶具有较强的 pH 值适用范围, 在
pH 4 ~ 13 纤维素酶活性变动幅度较小,pH 4 时相对
活性为 86郾 85% ,pH 13 时为最大活性的 86郾 26% .
总体来看,在碱性条件下要优于酸性条件下的反应
体系. B16 菌代谢产生纤维素酶的 pH 值适应性较
广, 具有工业应用前景.
2郾 5摇 酸碱稳定性
酸碱稳定性结果见图 7.
图 7摇 酸碱稳定性
Fig. 7摇 pH stability of CMCase
该纤维素酶在 pH 5 ~ 8 的内稳定性较高, 在 pH
5 条件下稳定性最好,pH 8 体系中保温 60 min 后还
有 93郾 81% 的酶活性. 当 pH 值低于 5 时纤维素酶
的稳定性变差,pH 3 下保温 60 min 后仅有 46郾 34%
的酶活性. 当 pH 值高于 8 时 ,保温 60 min 后其相对
活性缓慢降低,pH 13 下保温 60 min 后仍有 66郾 43%
的酶活性. 总之,B16 菌代谢产生纤维素酶在中性
或偏碱性条件下稳定性较好.
2郾 6摇 金属离子对酶活的影响
金属离子对酶活的影响见图 8.
图 8摇 金属离子对酶活性的影响
Fig. 8摇 Effect of metal ions to the CMCase activity
在 0郾 000 1 mol / L 浓度时, Mg2 + 、 K + 、 Na + 、
Cu2 + 、Ca2 + 、Mn2 + 、Zn2 + 和 Ba2 + 均对纤维素酶活性
有激活作用 ,其激活强度为 Na + (130郾 90% ) > Zn2 +
(128郾 35%) > Ba2 + (187郾 20%) > Mn 2 + (119郾 63%) >
Cu2 + (118郾 80%) > K + (113郾 93%) > Ca2 + (109郾 24%) >
Mg2 + (103郾 26%),而 Fe2 + (65郾 37%)、Li + (95郾 33%) 和
Co 2 + (57郾 07%) 对纤维素酶存在一定的抑制作用. 在
0郾 01 mol / L 浓度时,Mn2 + (126郾 65%)、Li + (163郾 97%)
和 Ba2 + (113郾 51%)对酶活性有一定激活作用,而 Na +
( 38郾 26%)、 Zn2 + ( 77郾 71%)、 Cu2 + ( 41郾 97%)、 K +
(78郾 48%)、 Ca2 + ( 64郾 23%)、 Mg 2 + ( 38郾 60%)、 Fe2 +
(62郾 40%) 和 Co2 + (40郾 24%)对该纤维素酶活性存在一
定的抑制作用.
综合所述:1) Mn 2 + 和 Ba2 + 在两种浓度梯度下
对酶均有激活作用;2) Li + 在低浓度时抑制酶活性 ,
而高浓度下反而起酶的激活剂作用;3) Na + 、Zn 2 + 、
Cu2 + 、K + 、Ca2 + 和 Mg 2 + 在 0郾 000 1 mol / L 时对该纤
维素酶起激活作用 , 在 0郾 01 mol / L 下抑制酶活性;
4) Fe2 + 和 Co2 + 在低浓度和高浓度下对酶活性均起
抑制作用, 随着金属离子浓度增加其抑制作用加强.
因此, 在酶的发酵生产中, 金属离子种类及其添加浓
度的选择至关重要.
2郾 7摇 纤维素酶系各酶活力分析
为确定 B16 菌株的纤维素酶系活力, 在测定羧
甲基纤维素酶 ( CMCase) 基础上, 进行了滤纸酶
(FPase)、 茁鄄 葡萄糖苷酶 ( 茁 鄄Gase)、 微晶纤维素酶
(C1) 活力测定,结果见图 9.
64 食品科学技术学报 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2014 年 5 月