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A郾 3T3-L1 前体脂肪细胞; B - S郾 分别对应表 2 中实验 1 ~ 18;T郾 最优条件(A2B3 C1D 3E1 ) 诱导后油红 O 染色结果. 标尺:20 滋m
图 1摇 3T3-L1 前体脂肪细胞油红 O 染色结果
Fig. 1摇 Results of oil red O staining of 3T3-L1 preadipocytes
目前诱导 3T3 - L1 前体脂肪细胞的条件中, 联
合诱导时间大多为 48 h,且胰岛素用量与胰岛素单
独诱导作用量相同, 如 Frost 等[4] 和刘芳芳等[6] 在
联合诱导和胰岛素单独诱导期间均用 1 滋g / mL 胰
岛素作用细胞,陈思凡等[5] 和郭晓农等 [7] 所用胰岛
素质量浓度则为 10 滋g / mL. 然而, 本研究发现 , 联
合诱导期间胰岛素为低质量浓度 (1 滋g / mL), 胰岛
素单独诱导作用量为高质量浓度 (10 滋g / mL) 时, 生
成脂肪量较多. 这可能由于在联合诱导期间, 地塞
米松和 IBMX 存在, 低质量浓度 (1 滋g / mL) 胰岛素
即可达到诱导效果; 而在胰岛素单独作用时则高质
量浓度(10 滋g / mL) 诱导分化效果优于其他处理 ( 即
胰岛素单独作用质量浓度为 5 滋g / mL 和 1 滋g / mL),
但由于 5 ~ 10 滋g / mL 胰岛素单独诱导差异不显著,
因此,胰岛素单独作用量选取 5 ~ 10 滋g / mL 均可.
此外,地塞米松作用量和胰岛素单独作用时间均没
有显著差异, 且对诱导结果没有显著影响, 因此地塞
米松作用量选取 0郾 25 ~ 1 滋mol / L 均可,诱导时间选
取 48 h 为宜.
4摇 结摇 论
1) IBMX 用量对 3T3-L1 前体脂肪细胞诱导分
化影响达极显著水平; 联合诱导时间和胰岛素单独
作用量的影响达显著水平 ;地塞米松、联合诱导时胰
岛素作用量及胰岛素单独作用时间影响不显著 .
2) 3T3-L1 前体脂肪细胞诱导分化成为成熟脂
肪细胞的最适宜条件为:500 ~ 750 滋mol / L IBMX,
0郾 25 ~ 1 滋mol / L 地塞米松,1 滋g / mL 胰岛素 ,在联合
诱导 72 h 后, 再用 5 ~ 10 滋g / mL 胰岛素诱导 48 h.
参考文献 :
[1]摇 舒思洁. 肥胖导致域型糖尿病胰岛素抵抗的作用机理及
其防治对策[J]. 时珍国医国药, 2006, 17(2): 264 -265.
[2]摇 L佼pez鄄Miranda J, P佴rez鄄Mart侏nez P, Marin C, et al.
Dietary fat, genes and insulin sensitivity[ J]. Journal of
Molecular Medicine, 2007, 85(3): 213 - 226.
[3]摇 郑国栋, 徐峰, 吴少福, 等. 绿茶成分对 3T3-L1 细胞
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第 32 卷 第 3 期摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 王友升等: 前体脂肪细胞 3T3-L1 诱导分化条件的优化