46 - 食品科学技术页

第 卷 第 期
2014 年 5 月
食 品 科 学 技 术 学 报
Journal of Food Science and Technology May 2014
doi:10. 3969 / j. issn. 2095鄄6002. 2014. 03. 008 文章编号 :2095鄄6002(2014)03鄄0043鄄05
引用格式:崔海洋 ,程仕伟, 黄田红,等. 产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌分离鉴定及酶学性质研究 . 食品科学技术学报,2014,32
(3):43 - 47.
CUI Haiyang,CHENG Shiwei,HUANG Tianhong,et al. Screening and identifying of Bacillus amyloliquefaciens for cellulase
production and its enzymatic characters. Journal of Food Science and Technology, 2014,32(3):43 - 47.
产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌分离鉴定及酶学性质研究
崔海洋,摇 程仕伟* ,摇 黄田红,摇 李秀娟,摇 杨立红,摇 陈国忠
( 鲁东大学 生命科学学院, 山东 烟台 摇 264025)
摘摇 要: 对一株产纤维素酶菌株进行分离鉴定, 并对其酶学特性进行了初步研究. 刚果红染色法
筛选产纤维素酶菌株 B16 ,采用形态观察、生理生化指标和 16S rDNA 确定其菌属来源,分析纤维素
酶的最适反应 pH 值和温度、酸碱和热稳定性 、金属离子对酶活性的影响, 最后考察纤维素酶系的
分布. 结果表明:筛选菌株为解淀粉芽孢杆菌,其较适反应温度为 30 益 , 较适 pH 8郾 0 ,在 10 ~ 60 益
呈高稳定性, 在 pH 5 ~ 8 时稳定性较强, Mn2 + 和 Ba 2 + 是该酶的激活因子. 除微晶纤维素酶活力
( 16郾 39 U / mL) 稍弱外, 滤纸酶 ( 70郾 37 U / mL )、 茁鄄葡萄糖苷酶 ( 131郾 55 U / mL )、 羧甲基纤维素酶
( 307郾 23 U / mL) 活力均相对较高 . 结果表明, 该酶在饲料添加剂方面具有应用潜力.
关键词: 纤维素酶; 分离鉴定; 解淀粉芽孢杆菌 ; 酶学性质
中图分类号: TS235 ; Q814郾 4摇 摇 摇 摇 摇 文献标志码 : A
收稿日期: 2013 08 07
基金项目: 山东省高等学校科技计划项目 (J12LD02).
作者简介: 崔海洋,男,硕士研究生,研究方向为酶工程;
*程仕伟,男,博士,主要从事生物化工方面的研究. 通讯作者.
摇 摇 纤维素酶是由作用方式不同但能协同催化降解
纤维素的 3 类酶组成的酶系, 可降解纤维素生成低
聚糖或葡萄糖[1] . 包括作用于纤维素分子内部非结
晶区的内切葡萄糖苷酶( 又称羧甲基纤维素酶 ), 作
用于线状分子末端的外切葡萄糖苷酶( 又称纤维二
糖水解酶或微晶纤维素酶) 和将纤维二糖水解成葡
萄糖的 茁鄄 葡萄糖苷酶 [2 - 3] .
纤维素酶广泛应用于饲料 、 食品、 纺织、 造纸
和洗涤等行业 [4 - 5] , 作为一种绿色饲料添加剂 , 将
饲料中的部分纤维素降解成可消化吸收的还原
糖 ,提高饲料利用率 [6] . 其营养机理 [7 - 11] :补充内
源酶的不足 ,溶解植物细胞壁促进吸收 ; 减低动物
胃肠道黏稠度 ,消除抗营养因子; 降低有害微生物
的附着生长 ;维持小肠绒毛形态完整等 .
多种微生物均可产纤维素酶 , 其中细菌来源
的纤维素酶具有耐碱、 耐热性等优良催化特性 , 培
养周期短且条件可控[12] , 因而在饲料用酶的研究
中受到广泛重视 . 本文通过对高产纤维素酶的一
株细菌进行分离鉴定及催化特性研究 , 为后期发
酵生产及其在饲料添加剂方面的实际应用提供数
据支撑 .
1摇 材料与方法
1郾 1摇 材料
水杨素和 3, 5鄄二硝基水杨酸,上海生物工程公
司 ;微晶纤维素 ,Sigma 公司; 细菌基因组抽提试剂
盒 ,Axygen 公司;EX Taq 酶和 dNTP,TaKaRa;Marker
DL5000, 广州东盛科技公司. 其余试剂均为分析纯
或生物纯.
1郾 2摇 培养基
菌种保藏培养基 :酵母粉 5 g / L,蛋白胨 10 g / L,
NaCl 10 g / L, 琼脂 20 g / L,pH 7郾 0. 121 益 下灭菌 15
min.
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