43 - 食品科学技术页

摇 摇 摇 摇 摇 表 2摇 3T3-L1 前体脂肪细胞诱导分化条件正交试验 L18 (3 7 ) 结果
Tab. 2摇 Results of induction and differentiation of 3T3-L1 preadipocytes L 18 (37 )
实验号
c(IBMX) /
(滋mol·L -1 )
c( 地塞米松) /
(滋mol·L -1 )
籽( 胰岛素) /
(滋g·mL -1 )
联合诱导
时间 / h
籽(胰岛素单独作用) /
(滋g·mL -1 )
胰岛素单独
作用时间 / h
OD
(520 nm)
1 0 0郾 25 1 48 10 48 1郾 32
2 0 0郾 5 5 60 5 60 1郾 27
3 0 1 10 72 1 72 1郾 30
4 500 0郾 25 1 60 5 72 1郾 97
5 500 0郾 5 5 72 1 48 1郾 80
6 500 1 10 48 10 60 1郾 70
7 750 0郾 25 5 48 1 60 1郾 30
8 750 0郾 5 10 60 10 72 1郾 74
9 750 1 1 72 5 48 2郾 02
10 0 0郾 25 10 72 5 60 1郾 41
11 0 0郾 5 1 48 1 72 1郾 11
12 0 1 5 60 10 48 1郾 35
13 500 0郾 25 5 72 10 72 1郾 92
14 500 0郾 5 10 48 5 48 1郾 68
15 500 1 1 60 1 60 1郾 86
16 750 0郾 25 10 60 1 48 1郾 64
17 750 0郾 5 1 72 10 60 2郾 32
18 750 1 5 48 5 72 1郾 84
均值 1 1郾 293 1郾 593 1郾 767 1郾 492 1郾 725 1郾 635
均值 2 1郾 822 1郾 653 1郾 58 1郾 638 1郾 698 1郾 643
均值 3 1郾 81 1郾 678 1郾 578 1郾 795 1郾 502 1郾 647
极差 0郾 529 0郾 085 0郾 189 0郾 303 0郾 223 0郾 012
表 3摇 3T3-L1 前体脂肪细胞诱导分化条件正交试验
方差分析表
Tab. 3摇 Mean standard deviation analysis of induction and
differentiation of 3T3-L1 preadipocytes
因素 偏差平方和 F 比 显著性
c(IBMX) / (滋mol·L -1 ) 1郾 092 121郾 33 **
c( 地塞米松) / (滋mol·L -1 ) 0郾 023 2郾 56 -
籽( 胰岛素联合作用) / (滋g·mL -1 ) 0郾 141 15郾 67 -
联合诱导时间 / h 0郾 276 30郾 67 *
籽( 胰岛素单独作用) / (滋g·mL -1 ) 0郾 179 19郾 89 *
胰岛素单独作用时间 / h 0郾 00 0郾 00 -
误差 0郾 01
注:*表示显著水平 P < 0郾 05;**表示显著水平 P < 0郾 01; - 表示
差异不显著;df = 2;F0郾 05 = 19,F0郾 01 = 99
3T3-L1 前体脂肪细胞分化程度( 图 1B 至图 1D,图
1K 至图 1M) 明显低于其他处理;相比而言 ,联合诱
导时间 72 h, 胰岛素单独作用量为 10 滋g / mL 时, 生
成的脂肪细胞数量较高( 图 1N 和图 1R), 与吸光度
测定的结果相一致. 同时可以看出,图 1E、图 1J、图
1N 和图 1R 所示的诱导条件下的脂肪细胞分化量
相对较高,其油红 O 染色的 OD 值也相应高于其他
处理( 表 2),进一步验证上述结论 .
3摇 讨摇 论
本研究的结果表明 , 在 3T3 - L1 前体脂肪细胞
诱导分化过程中 ,各因素对诱导分化结果影响的主
次顺序为 :IBMX、 联合诱导时间、 胰岛素单独作用
量 、联合诱导时胰岛素作用量、 地塞米松、 胰岛素单
独作用时间 . 3T3- L1 前体脂肪细胞诱导分化条件
主要受 IBMX、联合诱导时间和胰岛素单独作用量
的显著影响 , 其中 IBMX 的影响达极显著水平. 研
究表明 ,IBMX 是一种非选择性的环核苷酸磷酸二
酯酶抑制剂, 可提高胞内环磷酸腺苷 ( cyclic AMP,
cAMP) 浓度[10] ,而 cAMP 浓度升高后可激活蛋白激
酶 A(protein kinase A,PKA) [11] ,PKA 通过 PGC -1琢
激活过氧化物酶体增殖物激活受体 酌 ( Peroxisome
proliferator activated receptor 酌, PPAR酌) [12] . 在 3T3-
L1 前体脂肪细胞终末分化阶段中, 转录因子如
PPAR酌 大量表达,进而糖代谢相关基因表达 , 导致
脂滴形成并逐渐积累 [13] . 但对于 IBMX 通过调节胞
内 cAMP 水平而诱导 3T3-L1 前体脂肪细胞分化的
具体作用路径, 需进一步探讨.
04 食品科学技术学报 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2014 年 5 月