人计算
,
每日食用量不应超过
30 mg
[3]
。
上述事件曝光后
,
顺丁烯二酸
(
酐
)
的检测成为
关注焦点
,
但由于顺丁烯二酸和食品中允许使用的
反丁烯二酸互为同分异构体
,
分子量和分子式相同
,
理化性质近似
,
吸收光谱图也一致
,
在检测中容易出
现假阳性
。
因此
,
在检测顺丁烯二酸的同时
,
需要同
时检测反丁烯二酸
,
以减少误判
,
因此研究建立多种
食品中顺丁烯二酸
(
酐
)
和反丁烯二酸的检测方法
具有重要的现实意义
。
近年来
,
反丁烯二酸作为食品中的酸度调节剂
应用较广
,
因此国内外有关食品中对其含量检测的
文献报道较多
[5 - 10]
,
但对于分离检测淀粉和淀粉制
品中反丁烯二酸含量的报道不多
。
顺丁烯二酸
(
酐
)
的检测方法主要集中在色谱法
[11 - 15]
,
我国现
有的国家标准
GB / T 23296郾 21—2009
也是采用高效
液相色谱及内标法对食品模拟物中顺丁烯二酸及顺
丁烯二酸酐进行分离与测定
[14]
。
但文献报道的色
谱法检测顺丁烯二酸
(
酐
)
的前处理不适于复杂基
质
。
本文针对前处理方法进行了系统的研究
,
建立
了适用于淀粉和淀粉食品中顺丁烯二酸
、
顺丁烯二
酸酐和反丁烯二酸含量测定的固相萃取
-
超高效液
相色谱分析方法
,
方法易于操作
,
便于推广
。
1摇
材料与方法
1郾 1摇
材料与试剂
ProElut PWA
型固相萃取小柱
(500 mg / 6 mL),
中国迪马科技
;HSS T3
型
Waters Acquity
色谱柱
,
(2郾 1 mm 伊 150 mm 伊 1郾 8 滋m),
美国
Waters
公司
;
0郾 2 滋m
微孔滤膜
(Whatman,nylon,Puradisc 13),
美
国
GE
公司
;
甲酸
,
准
= 96% ,
色谱纯
,
美国
ROE
公
司
;
氨水
,
分析纯
,
北京化工厂
;
乙腈
,
色谱纯
,
美国
Fisher
公司
;
甲醇
,
色谱纯
,
美国
Fisher
公司
;
超纯
水
,
自制
;
磷酸
,
色谱纯
,
中国迪马科技
。
标准物质顺丁烯二酸和反丁烯二酸
,
纯度均大
于
99郾 0% ,
美国
Arocs
公司
。
由于顺丁烯二酸酐遇
水即水解
,
在提取后仪器实际检测的为顺丁烯二酸
,
所以购买的标准品仅为顺丁烯二酸
。
实验所选用样品的面条
、
粉丝
、
芋圆
、
珍珠粉圆
、
木薯淀粉
、
红薯淀粉
、
玉米淀粉
、
马铃薯淀粉
、
小麦粉
等均购自超市
。
1郾 2摇
仪器与设备
Nexera LC -30A
型超高效液相色谱仪
,
配有二
极管矩阵紫外检测器及数据处理系统
,
日本
Shimad鄄
zu
公司
;3k15
型高速冷冻离心机
,
德国
Sigma
公司
;
KQ-500E
型超声波清洗器
,
昆山市超声仪器有限公
司
;MS 3 basic
型旋涡混合器
,
德国
IKA
公司
;Milli -
Q
型超纯水仪
,
美国
Millipore
公司
;Omni THQ
型数
字组织均质机
,
美国
Omni
公司
;
电子分析天平
(
感
量
0郾 000 1 g),
德国
Sartorius
公司
。
1郾 3摇
实验方法
1郾 3郾 1摇
标准溶液的配制
分别准确称取顺丁烯二酸和反丁烯二酸
,
用超
纯水溶解后
,
容量瓶定容
,
配成
500 mg / L
的标准储
备液
,4 益
冷藏
。
使用前用
准
(
磷酸
) = 0郾 1%
水溶液
分别稀释制
0郾 10,0郾 20,0郾 50,1郾 00,5郾 00,10郾 00,
20郾 00,30郾 00,50郾 00 mg / L
的标准工作溶液
。
1郾 3郾 2摇
样品前处理
芋圆
、
珍珠粉圆属于黏性大的淀粉样品是准确
称取样品
2郾 00 g(
精确至
0郾 01 g)
于
50 mL
离心管
中
,
加入甲酸水溶液
(pH
值
= 5)25 mL,
用组织均质
机在提取液中均质样品
2 min。
红薯淀粉
、
粉丝等其他黏性小的淀粉样品是固
体类的淀粉样品用粉碎机磨碎后
,
准确称取样品
2郾 00 g(
精确至
0郾 01 g)
于
50 mL
离心管中
,
加入甲
酸水溶液
( pH
值
= 5)25 mL,
用旋涡混合器涡旋
2
min
混匀
。
将处理过的样品超声提取
10 min
后
,
离心
,
取
上清溶液
5 mL
于
ProElut PWA
柱
(
预先用
5 mL
甲
醇
、5 mL
准
(
甲酸
) = 2%
的水溶液活化处理过
),
以
1
mL·min
- 1
的流速过柱
,
再依次加入淋洗液
5 mL
准
(
甲酸
) = 2%
水溶液
、5 mL
乙腈和
5 mL
甲醇
,
用
10
mL
准
(
氨水
) = 8%
的甲醇溶液洗脱
,
控制洗脱液流
速不超过
1 mL·min
- 1
,
收集洗脱液
,
在
45 益
水浴中
氮吹至近干
,
加入
1 mL
准
(
磷酸
) = 0郾 1%
水溶液复溶
,
溶液经
0郾 2 滋m
微孔滤膜过滤
,
滤液供
UHPLC
分析
。
1郾 3郾 3摇
色谱条件
流动相
准
(
磷酸
) = 0郾 10%
水溶液与甲醇的体积
比为
98颐 2;
流速
0郾 2 mL / min;
柱温
30 益;
进样量
10
滋L;
检测波长
214 nm。
2摇
结果与分析
2郾 1摇
色谱条件的选择
2郾 1郾 1摇
流动相的选择
用反相色谱分析顺丁烯二酸
、
反丁烯二酸时
,
为
35
第
33
卷 第
5
期
摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
别
摇
玮等
: SPE鄄UHPLC
测定淀粉及淀粉制品中丁烯二酸类酸度调节剂
