FE20
型实验室
pH
计
,
梅特勒
-
托利多仪器
(
上海
)
有限公司
;SC -2
型磁力搅拌器
,
上海县曹行无线电
元件厂
;MP -501A
型超级恒温循环槽
,
上海一恒科
技有限公司
;CT14D
型高速离心机
,
上海天美生化
仪器设备工程有限公司
;UV -1100
型分光光度计
,
上海美谱达仪器有限公司
;AA -240FS
型火焰原子
吸收仪
,
安捷伦科技有限公司
;
石墨炉原子吸收仪
,
安捷伦科技有限公司
;
自动消化装置
,
上海晟声自动
化分析仪器有限公司
;KDN -103F
型自动凯氏定氮
仪
,
上海纤检仪器有限公司
。
1郾 3摇
实验方法
1郾 3郾 1摇
牡蛎匀浆中糖原和蛋白质的分离
将新鲜牡蛎肉洗净后用高速组织捣碎机捣碎成
匀浆
,
称取
10 g
牡蛎匀浆
,
加入一定量的有机酸
,
用
盐酸和氢氧化钠调节
pH
值
,
于磁力搅拌器上搅拌
浸泡一定时间后
,5 000 r / min
离心
10 min,
得到上清
液和沉淀
,
取样测定上清液中总糖和粗蛋白浓度
。
实验流程见图
1。
图
1摇
牡蛎匀浆中糖原和蛋白质的分离
Fig. 1摇 Separation of glycogen and protein in oyster homogenate
1郾 3郾 2摇
数据计算方法
以上清液中总糖
、
粗蛋白的保留率及上清液中
总糖与粗蛋白浓度之比为考察指标
,
分别考察有机
酸种类
、pH
值
、
时间
、
料液比
、
浓度及温度对糖原和
蛋白质分离效果的影响
。
上清液中粗蛋白保留率
X
按式
(1)
计算
。
X
=
C
1
m
1
C
0
m
0
伊 100
%
,
(1)
式
(1)
中
,
X
为上清液中粗蛋白的保留率
,% ;
C
1
为
离心上清液中粗蛋白的质量比
;
C
0
为牡蛎匀浆液中
粗蛋白的质量比
;
m
1
为离心后上清液的质量
,g;
m
0
为所取牡蛎匀浆液的质量
,g。
上清液中总糖的保留率
Y
按式
(2)
计算
。
Y
=
C
3
m
1
C
2
m
0
伊 100
%
,
(2)
式
(2)
中
,
Y
为上清液中粗蛋白的保留率
,% ;
C
3
为离
心上清液中总糖的质量比
;
C
2
为牡蛎匀浆液中总糖
的质量比
;
m
1
为离心后上清液的质量
,g;
m
0
为所取
牡蛎匀浆液的质量
,g。
上清液中总糖浓度与粗蛋白浓度之比
S
按式
(3)
计算
。
S
=
C
3
C
1
摇 ,
(3)
S
越大说明分离效果越好
。
1郾 3郾 3摇
单因素实验
1郾 3郾 3郾 1摇
有机酸种类对糖原和蛋白质分离效果的
影响实验
分别配置
0郾 2 mol / L
的柠檬酸
、
乙酸
、
琥珀酸
、
酒石酸溶液
,
取一定量的牡蛎匀浆液
,
将其与有机酸
溶液按照料
( g)
液
(mL)
比
1颐 3
比例混合
,
同时用水
与牡蛎匀浆液按同比例混合作为对照
,
用
4 mol / L
的氢氧化钠溶液或
4 mol / L
的盐酸溶液将
pH
值调
至
6郾 0,
于
15 益
下用磁力搅拌器搅拌反应
2 h
后离
心分离
。
1郾 3郾 3郾 2摇 pH
值对糖原和蛋白质分离效果的影响
实验
取一定量的牡蛎匀浆液
,
将其与
0郾 2 mol / L
的
乙酸溶液按照料
( g)
液
(mL)
比
1 颐 3
比例混合
,
用
4
mol / L
的氢氧化钠溶液或
4 mol / L
的盐酸溶液将
pH
值分别调至
3郾 0,4郾 0,5郾 0,5郾 5,6郾 0,6郾 5,7郾 0,
于
15
益
下用磁力搅拌器搅拌反应
2 h
后离心分离
。
1郾 3郾 3郾 3摇
时间对糖原和蛋白质分离效果的影响
实验
取一定量的牡蛎匀浆液
,
将其与
0郾 2 mol / L
的
乙酸溶液按照料
( g)
液
(mL)
比
1 颐 3
比例混合
,
用
4
mol / L
的氢氧化钠溶液或
4 mol / L
的盐酸溶液将
pH
值调至
6郾 5,
分别于
15 益
下用磁力搅拌器搅拌反应
30,45,60,90,120,180 min
后离心分离
。
1郾 3郾 3郾 4摇
料液比对糖原和蛋白质分离效果的影响
实验
料液比即牡蛎匀浆液的质量
( g)
与有机酸溶液
的体积
(mL)
之比
。
取一定量的牡蛎匀浆液
,
将其与
0郾 2 mol / L
的乙酸溶液分别按照
1颐 1,1颐 3,1颐 5,1颐 10
比例混合
,
用
4 mol / L
的氢氧化钠溶液或
4 mol / L
的
盐酸溶液将
pH
值调至
6郾 5,
于
15 益
下用磁力搅拌
器搅拌反应
0郾 5 h
后离心分离
。
1郾 3郾 3郾 5摇
乙酸浓度对糖原和蛋白质分离效果的影
响实验
取一定量的牡蛎匀浆液
,
将其分别与
0郾 05,
0郾 10,0郾 20,0郾 30,0郾 50,1郾 00 mol / L
的乙酸溶液分别
按照料
(g)
液
(mL)
比
1颐 1
比例混合
,
用
4 mol / L
的氢
氧化钠溶液或
4 mol / L
的盐酸溶液将
pH
值调至
6郾 5,
于
15 益
下用磁力搅拌器搅拌反应
0郾 5 h
后离心
分离
。
45
食品科学技术学报
摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
摇 2016
年
5
月
