酚抗 体 的 孵 育 液 中 孵 育 后
,
在
2 mmol / L
的
K
3
Fe(CN)
6
的
PBS
溶液中的
DPV
曲线
,
见图
6(
图
6
中曲线
a
为空白缓冲溶液
,
曲线
b ~ h
分别为含有相
同浓度的己烯雌酚抗体和己烯雌酚浓度依次为
2 500 滋g / L,1 500 滋g / L,1 000 滋g / L,500 滋g / L,100
滋g / L,1 滋g / L
和
0
的孵育液
)。
a.
空白缓冲溶液
; b ~ h
是含有相同浓度的己烯雌酚抗
体和不同浓度的己烯雌酚的孵育液
。
插入图为响应电
流的变化
驻
I
与己烯雌酚浓度的工作曲线
图
6摇
修饰电极在缓冲溶液和含有相同浓度的己烯雌酚
抗体与不同浓度的己烯雌酚中的
DPV
曲线
Fig. 6摇 DPV curves of modified immunosensor after incuba鄄
ting with blank solution and various concentrations of
DES combined with same concentration of DES anti鄄
body in buffer solution
当溶液中游离己烯雌酚浓度逐渐增加时
,
抗体
与游离己烯雌酚结合的部分随之增加
,
而与电极上
修饰的己烯雌酚结合的部分相应减少
,
对电极导电
能力的阻碍随之减小
,
因此
DPV
峰电流的增加值
驻
I
逐渐增大
。
结果表明
,驻
I
与溶液中己烯雌酚密
度在
1 ~ 2 500 滋g / L
范围内呈良好的线性关系
,
线性
回归方程为
驻
I
= 25郾 036 8 + 0郾 003 42
籽
,
R
= 0郾 991 24,
式中
驻
I
,滋A;
籽
,滋g / L,
最低检测限为
0郾 1 滋g / L。
2郾 5摇
免疫传感器的重复性
、
稳定性与再生
对石墨烯
-
壳聚糖
-
己烯雌酚修饰电极重复进
行
10
次
DPV
扫描
,
峰电流值变化小于
5% ,
说明本
实验具有较好的可重复性
。
将
2
支修饰电极分别存
放在磷酸缓冲溶液
(pH
值
= 7郾 4)
和空气中
,
每天进
行
DPV
扫描
,
峰电流值在
5 d
内降低值不超过
10% ,
说明制备的修饰电极具有较好的稳定性
。
将孵育过的修饰电极置于
0郾 1 mol / L
的甘氨酸
- HCl
缓冲溶液
(pH
值
= 2郾 8)
中浸泡
20 min,
可以
洗去吸附在电极表面的己烯雌酚抗体
。
2郾 6摇
实际样品的分析
对猪肉
、
牛肉
、
鸭肉及奶粉
4
种实际样品以实验
步骤
1郾 4
中所述方法进行前处理
,
然后用优化的实
验条件进行测定
,
每个添加浓度测定
3
次
,
统计结果
见表
1。
表
1摇
样品加标处理测试己烯雌酚实验结果
Tab. 1摇 Recoveries of diethylstilbestrol from spiked samples
样品
添加
籽
(
己烯
雌酚
) /
(滋g·L
-1
)
实测
籽
(
己烯雌酚
) /
(滋g·L
-1
)
己烯雌酚
回收率
/
%
平均
回收率
/
%
400郾 0
498郾 5, 504郾 5, 395郾 3
93郾 2
猪肉
1 000郾 0 943郾 7,1 003郾 7, 1 008郾 2
98郾 5 96郾 5
2 000郾 0 1 550郾 1, 2 137郾 2, 2 182郾 4 97郾 8
400郾 0
395郾 2,472郾 8,414郾 8
100郾 9
鸭肉
1 000郾 0
995郾 3,1 156郾 6,1 046郾 9 106郾 6 102郾 2
2 000郾 0 1 975郾 8,2 137郾 2,1 827郾 6 99郾 0
400郾 0
363郾 0,314郾 8,354郾 8
86郾 1
牛肉
1 000郾 0
1 158郾 5,1 148郾 9,853郾 4 105郾 4 98郾 2
2 000郾 0 2 382郾 4, 2 001郾 8,1 808郾 2 103郾 2
400郾 0
328郾 2, 427郾 2, 453郾 2
100郾 9
奶粉
1 000郾 0 1 014郾 6, 1 021郾 0, 1 167郾 0 106郾 8 102郾 8
2 000郾 0 1 653郾 2,2 093郾 4, 2 285郾 6 100郾 6
摇 摇
从表
1
中可以看出
,
猪肉样品中添加己烯雌酚
的回收率在
93郾 2%
~
98郾 5% ,
鸭肉样品添加己烯雌
酚的回收率在
99郾 0%
~
106郾 6% ,
牛肉样品的回收率
在
86郾 1%
~
105郾 4% ,
牛奶样品的回收率在
100郾 6%
~
106郾 8% 。
3摇
结
摇
论
本文构建了一种基于石墨烯
-
壳聚糖
-
己烯雌
酚修饰电极的电化学免疫传感器
,
结合了石墨烯高
比表面积
、
高导电性能
,
以及壳聚糖的优良成膜性
能
。
采用竞争法检测己烯雌酚时
,
线性范围为
1 ~
2 500 滋g / L,
检测限为
0郾 1 滋g / L,
完全能满足国家对
于雌酚类兽药残留规定的检测要求
[2]
。
将此免疫
传感器用于猪肉
、
鸭肉
、
牛肉及奶粉实际样品中己烯
雌酚的检测
,
回收率在
93郾 2% ~ 106郾 8% 。
参考文献
:
[1]摇 BURROUGHS W, CULBERTSON C C, CHENG E,
et al. The influence of oral administration of diethylstil鄄
bestrol to beefcattle [ J ]. Journal of Animal Science,
1955, 14(4): 1015 - 1024.
96
第
34
卷 第
1
期
摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
黄生权等
:
石墨烯
-
壳聚糖复合材料修饰电极检测己烯雌酚
