食品科学技术学报201503 - page 51

行优化。
2郾 2郾 1摇 给酶量对固定化柚苷酶活力的影响
取氧化石墨烯粉末 0郾 05 g 分别加入到 4 mL
籽( 柚苷酶) 分别为 0郾 25, 0郾 50, 0郾 75, 1郾 00, 1郾 25,
1郾 75 mg / mL 的酶液中(pH 4郾 0,0郾 2 mol / L 醋酸缓冲
液) 中,25 益 恒温振荡 (180 r / min) 2 h,4 益 冰箱中
吸附 6郾 0 h。 在 4 益 ,12 000 r / min 条件下冷冻离心
10 min ,分离游离酶液 。 即得氧化石墨烯固定化柚
苷酶,4 益 冰箱中保存后并测酶活,见图 4。
图 4摇 给酶量对氧化石墨烯固定化柚苷酶
活力的影响
Fig. 4摇 Effect of different amounts of enzyme on activity of
graphene oxide immobilized naringinase
摇
由图 4 可见, 在柚苷酶质量浓度在 0郾 25 ~
1郾 00 mg / mL 时, 随着质量浓度的增加氧化石墨烯
分子间的空隙还未完全吸附完全, 当质量浓度超
过 1郾 00 mg / mL 时, 随着质量浓度的增加氧化石墨
烯分子已经吸附饱和状态, 继续增加会降低酶活 ,
因此 0郾 05 g 氧化石墨烯固定化柚苷酶的较佳质量
浓度为 1郾 00 mg / mL, 即每克氧化石墨烯材料的载
酶率为 80 mg。
2郾 2郾 2摇 不同 pH 值对氧化石墨烯固定化柚苷酶酶
活的影响
确定氧化石墨烯固定化柚苷酶的较佳质量浓度
为 1郾 00 mg / mL, 配制 pH 值为 2郾 0,3郾 0,4郾 0,5郾 0,
6郾 0,7郾 0,8郾 0 的磷酸缓冲液,用来配制对应 pH 值的
质量浓度为 1郾 00 mg / mL 柚苷酶溶液 4 mL, 加入氧
化石墨烯粉末 0郾 05 g,25 益 恒温振荡(180 r / min) 2
h,4 益 冰箱中吸附 6郾 0 h。 在 4 益,12 000 r / min 条件
下冷冻离心 10 min,分离游离酶液。 即得氧化石墨
烯固定化柚苷酶 ,4 益 冰箱中保存后并测酶活, 见
图 5。
由图 5 可见, 在 pH 值小于 4郾 0 的酸性条件下
图 5摇 pH 值对氧化石墨烯固定化柚苷酶
活力的影响
Fig. 5摇 Effect of different pH values on activity of graphene
oxide immobilized naringinase
摇
氧化石墨烯固定化柚苷酶活力下降迅速 , 在 pH 值
大于 4郾 0 甚至升至中性条件下氧化石墨烯固定化柚
苷酶活力下降更加迅速,最适的 pH 值为 4郾 0。
2郾 2郾 3摇 不同温度对氧化石墨烯固定化柚苷酶酶活
的影响
确定氧化石墨烯固定化柚苷酶的较佳质量浓度
为 1郾 00 mg / mL, 较佳 pH 值为 4郾 0。 分别取氧化石
墨烯粉末 0郾 05 g 加入到 4 mL、pH 4郾 0、1郾 00 mg / mL
柚苷酶溶液, 在 20,25,30,35,40,45,50 益 条件下 ,
恒温振荡 (180 r / min) 2 h,4 益 冰箱中吸附 6郾 0 h。
在 4 益 ,12 000 r / min 条件下冷冻离心 10 min, 分离
游离酶液。 即得氧化石墨烯固定化柚苷酶,4 益 冰
箱中保存后并测酶活 ,见图 6。
图 6摇 温度对氧化石墨烯固定化柚
苷酶活力的影响
Fig. 6摇 Effect of different temperatures on activity of
graphene oxide immobilized naringinase
摇
由图 6 可知,在氧化石墨烯吸附柚苷酶时,当温
度超过室温 25 益 时 , 随着温度的升高, 相对酶活迅
64 食品科学技术学报 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2015 年 5 月