U / g,
是其他
3
种材料的
20
倍以上
。
2郾 1郾 2摇
固定化柚苷酶载酶率的比较
壳聚糖微球由于本身不太稳定
,
操作时柚苷酶
酶液容易使其小部分分散
,
致使吸附不能完全
,
载酶
率为
28郾 34% 。
海藻酸钠微球透明有弹性
,
载酶率
高达
91郾 81% 。
活性炭分子亦有极强的吸附能力
,
载酶率为
76郾 11% 。
氧化石墨烯本身具有的很强共
价键吸附能力
,
使其载酶率达
85郾 61% 。
2郾 1郾 3摇
固定化柚苷酶重复使用率的比较
壳聚糖固定化柚苷酶由于本身吸附的不稳定
性
,
以及在反应时受外在条件如温度
、pH
值的影响
,
使其在多次重复使用后相对酶活下降迅速
。
在重复
使用第
2
次时酶活为第
1
次的
74郾 31% ,
第
3
次为
39郾 96% ,
第
4
次为
36郾 73% ,
第
5
次为
33郾 80% ,
第
6
次为
19郾 13% ,
第
7
次使用时已降到
15郾 02%
的相对
酶活
。
海藻酸钠固定化柚苷酶重复使用情况见图
1。
图
1摇
不同使用次数对海藻酸钠固定化柚苷酶
相对酶活的影响
Fig. 1摇 Effect of using times on relative activity of
alginate immobilized naringinase
由图
1
可见
,
由于其较强的耐热耐酸等稳定性
,
海藻酸钠固定化柚苷酶在使用
7
次后相对酶活保持
在
51郾 78%
的水平
,
随着使用次数的增多逐步下降
。
活性炭固定化柚苷酶重复使用情况见图
2。
由图
2
可见
,
由于活性炭的比表面积较小
,
不能
很好地释放柚苷酶分子
,
相对酶活迅速下降
,3
次使
用后相对酶活已下降到
38郾 13% ,
使用
7
次后为
10郾 57% 。
氧化石墨烯固定化柚苷酶重复使用情况见图
3。
由图
3
可见
,
氧化石墨烯固定化柚苷酶的非共价
键吸附方式可以稳定地吸附柚苷酶分子
,
又可以逐
步有效地释放柚苷酶分子
,
达到较好的重复利用效
果
,3
次使用后仍可以保持在
89郾 18%
相对酶活水
图
2摇
不同使用次数对活性炭固定化柚苷酶的
相对酶活的影响
Fig. 2摇 Effect of using times on relative activity of activated
carbon immobilized naringinase
图
3摇
不同使用次数对氧化石墨烯固定化柚苷酶
相对酶活的影响
Fig. 3摇 Effect of using times on relative activity of graphene
oxide immobilized naringinase
平
,
使用
7
次后仍有
72郾 38%
相对酶活
。
氧化石墨
烯大比表面积的石墨片与生物分子均匀附着
,
并不
改变附着的生物分子的天然生化特性
,
固定化的
茁鄄
半乳糖苷表现出优异的重复利用性
,
经过
10
次重复
使用保留
92%
以上的酶活性
,
以及理想的性能
[18]
。
2郾 2摇
氧化石墨烯固定化柚苷酶工艺条件优化
对比壳聚糖
、
海藻酸钠
、
活性炭和氧化石墨烯固
定化柚苷酶的酶活
、
载酶率和重复使用时的相对酶
活情况
。
可以看出氧化化石墨烯固定化柚苷酶有最
高的酶活
410郾 5 U / g,
是其他材料的
20
多倍
。
载酶
率海藻酸钠为
92郾 81% ,
氧化化石墨烯为
85郾 61%
次
之
。
经过重复使用后壳聚糖
、
海藻酸钠
、
活性炭的相
对酶活达到
51郾 78%
甚至更低
,
氧化化石墨烯经过
7
次使用过后仍保持
72郾 38%
的相对酶活
。
综合评定
氧化石墨烯为较佳固定化柚苷酶材料
。
为了更好地
利用这种新型材料
,
对其固定化柚苷酶工艺条件进
54
第
33
卷 第
3
期
摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
段志涛等
:
不同材料固定化柚苷酶的比较