28 - 食品科学技术学报页

解于 200 滋L 二甲基亚砜 (DMSO) 中 , 旋转震荡, 待
全部溶解后,0郾 22 滋m 过滤器过滤,少量分装后 - 20
益 保存, 将其质量浓度稀释为 250 g / L.
2郾 2摇 蛇六谷葡甘聚糖短链分子对 HeLa 增殖的抑
制率测定 [12 - 13,15 - 16]
1) 将人宫颈癌细胞 HeLa 细胞株接种在质量分
数为 10% 胎牛血清中,加入具有 1% 抗生素、2 mol / L 谷
氨酰胺的 RPMI -1640(Gibco) 培养液中,37 益,5%
CO2 培养箱中培养.
2) 取处于对数生长期的 HeLa 细胞经胰酶消化
后, 调整细胞密度为 1 伊 105 个 / mL, 接种到 96 孔培
养板.
3) 每孔 0郾 1 mL,培养 12 h, 待细胞完全贴壁后,
加入用 RPMI -1640 培养液配制的各浓度样品 (50,
100,200, 400, 800 滋mol / L), 每个浓度均做 3 个
复孔.
4) 培养 48 h 后, 每孔加入 MTT 15 滋L,继续培养
4 h,离心条件弃去上清液 ,加入 150 滋L DMSO,振荡
10 min,于酶标仪上在 490 nm 进行比色测定,其平均
值为细胞存活的光密度 , 计算每个样品的细胞抑
制率.
2郾 3摇 蛇六谷葡甘聚糖短链分子对 S180 荷瘤小鼠肿
瘤生长及胸腺、脾指数的影响实验[14,16 - 17]
昆明小鼠,雄性,4 ~ 6 周龄,体重 (20 依 2) g,自
由进食. 从预先培养的荷瘤小鼠腹腔中抽出含 S180
的腹水, 用无菌生理盐水稀释. 摇匀后,取此细胞液
加台盼蓝 ( trypanblue) 染色, 计数, 细胞存活率在
95% 以上. 将 S180 细胞悬液 0郾 2 mL 接种于实验小
鼠的右前肢腋皮下,制备移植瘤模型 . 接种 24 h 后
称小鼠体重, 并随机分为 5 组 . 空白对照组与环磷
酰胺 25 mg / (kg·d) 组分别为阴、 阳性对照组, 过氧
乙酸(PPA) 用无菌生理盐水溶解, 从高到低设 4 个
剂量组, 分别为 600,400,200,100 mg / (kg·d) . 接种
24 h 后灌胃给药, 每天 1 次 ,共给药 10 d. 停药后第
2 天脱颈处死荷瘤小鼠,称体重 ,分离瘤块等称重.
抑瘤率 = 阴性对照组瘤重 - 治疗组瘤重
阴性对照组瘤重 伊 100% .
3摇 结果与分析
3郾 1摇 蛇六谷葡甘聚糖短链分子对 HeLa 细胞增殖
的影响
表 1 为蛇六谷葡甘聚糖短链分子与 HeLa 细胞
生长的关系 . 从表 1 可以看出, 随着蛇六谷葡甘聚
糖短链分子质量浓度的增大 ,HeLa 细胞吸光度降
低 ,对其生长的抑制率逐渐提高,当蛇六谷葡甘聚糖
短链分子质量浓度达到 8郾 0 g / L 时, 对 HeLa 细胞生
长的抑制率可达到 10郾 98% . 实验表明, 在一定浓度
范围内 ,HeLa 细胞生长抑制率与蛇六谷葡甘聚糖短
链分子的质量浓度成正相关,因此, 蛇六谷葡甘聚糖
短链分子能够抑制 HeLa 细胞的生长, 但总体抑制
效果不明显 .
表 1摇 蛇六谷葡甘聚糖短链分子对 HeLa 细胞生长的影响
Tab. 1摇 Effects of KGM short chain polymer of rhizoma
amorphophalli on growth of HeLa cells
组别 籽/ (g·L -1 ) 吸光度 抑制率 / %
对照组 0 1郾 120 依 0郾 025 -
1 0郾 5 1郾 114 依 0郾 045 0郾 54
2 1郾 0 1郾 068 依 0郾 036 4郾 64
3 2郾 0 1郾 025 依 0郾 042 8郾 48
4 4郾 0 1郾 008 依 0郾 037 10郾 00
5 8郾 0 0郾 997 依 0郾 051 10郾 98
3郾 2摇 蛇六谷葡甘聚糖短链分子对 S180 荷瘤小鼠肿
瘤生长及胸腺、脾指数的影响
表 2 为蛇六谷葡甘聚糖短链分子与 S180 荷瘤
小鼠瘤重的关系. 从表 2 可以看出, 在生理盐水实
验组中, 经检测 S180 荷瘤小鼠的肿瘤质量为
0郾 904 4 g;当加入低浓度的蛇六谷葡甘聚糖短链分
子时, 肿瘤质量为 0郾 814 2 g,抑制率为 9郾 97% ;当加
入中浓度的蛇六谷葡甘聚糖短链分子时, 肿瘤质量
为 0郾 637 3 g,抑制率为 29郾 53% ;当加入高浓度的蛇
六谷葡甘聚糖短链分子时 ,肿瘤质量为 0郾 587 7 g,抑
表 2摇 蛇六谷葡甘聚糖短链分子对 S180 荷瘤小鼠
瘤重的影响
Tab. 2摇 Effects of KGM short chain polymer of rhizoma amor鄄
phophalli on tumor weight of S180 tumor bearing mice
组别
给药剂量 /
(mg·(kg·d) -1) m( 肿瘤) / g 抑制
率 / %
阴性对照( 生理盐水) - 0郾 904 4 依 0郾 070 8 -
阳性对照( 环磷酰胺) 25 0郾 483 8 依 0郾 083 4 46郾 51
低剂量 50 0郾 814 2 依 0郾 160 7 9郾 97
中剂量 100 0郾 637 3 依 0郾 089 9 29郾 53
高剂量 300 0郾 587 7 依 0郾 073 6 35郾 02
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第 32 卷 第 6 期摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 何明祥: 蛇六谷葡甘聚糖抗肿瘤研究