摇 摇
龙眼
(
Dimocarpus longan
Lour. )
为无患子科龙眼
属常绿果树
,
是一种药食兼用的滋补佳品
,
其果实营
养丰富
,
成为倍受人们推崇的
“
果中圣品
冶。 Bazzano
等
[1 -2]
研究认为
,
龙眼的保健作用主要来源于其特有
的生物活性物质及其抗氧化作用
。
龙眼中的多酚和
黄酮类物质可保护机体细胞和组织免受活性氧和自
由基攻击造成的损伤
,
起到延缓细胞老化和预防疾病
的作用
。
长期以来
,
对龙眼的研究多集中在化学成分
和理化性质等方面
[3 -4]
,
而对其生物活性方面研究较
少
,
研究并开发此类天然生物活性的物质具有非常重
要的意义
。
龙眼果肉富含多酚
、
多糖
、
类黄酮等具有
生物活性以及药理活性的有效成分
[5 -6]
。
现代药理
研究表明
,
多酚和黄酮物质均具有抗氧化
[7]
、
抗肿
瘤
[8]
、
增强免疫力
[9]
、
调节内分泌及神经系统
[10 -11]
等
活性
,
并且抗氧化作用是其多种生理活性功能的重要
机制之一
。
王玲等
[12]
对龙眼多糖抗氧化能力进行研
究
,
发现当多糖质量浓度大于
100 滋g / mL
时
,
浓度与
羟自由基清除能力存在量效关系
,
但是超氧阴离子自
由基的清除作用不太明显
。
石俊等
[13]
研究了龙眼果
肉干制过程前后的多酚含量
、
存在形式及单体酚的组
成和其抗氧化能力的差异
,
经干燥后龙眼果肉游离酚
含量
、FRAP
抗氧化值和
DPPH
抗氧化能力值均显著
下降
,
结合酚含量及
FRAP
抗氧化值显著上升
。
植物
中酚类物质呈现游离态和结合态两种不同的存在形
式
。 Sun
等
[14]
对
11
种常见普通水果的研究表明
,
其
总多酚含量中平均含有大约
24%
的结合酚
,
因而
,
单
纯用溶剂直接提取植物组织中可溶性酚类物质往往
造成对其总酚含量的低估而不能全面评价酚类物质
。
一直以来
,
人们对龙眼果肉中酚类物质的报道主要集
中在游离态而忽视对结合态酚类物质的研究
,
没有较
全面地评价其存在特征
。
因此
,
为了充分利用龙眼资
源
,
本研究选取
24
个华南地区主栽龙眼品种
,
对不同
品种龙眼的体外抗氧化活性差异进行研究
,
试图筛选
出抗氧化活性强
、
总酚和总黄酮含量高的龙眼品种
,
为揭示龙眼抗氧化作用的物质基础提供依据
,
为龙眼
的精深加工和栽培品种的选育提供科学指导
。
1摇
材料与方法
1郾 1摇
实验材料
1郾 1郾 1摇
龙眼品种资源
24
个龙眼品种均采摘自广东省农科院果树研究
所龙眼资源圃
。
龙眼品种包括
:
蜀冠
、
沙梨肉
、
驼背
木
、
后壁埔
、
赐合种
、
鸡卵眼
、
公妈本
、
后巷车
、
东壁
、
沙
梨木
、
龙优
、
石硖
、
红核
、
罗伞木
、
硬赤壳
、
早白露
、
福
眼
、
巨龙
、
水涨
、
乌龙岭
、
普明庵
、
华露广眼
、
储良
、
油潭
本
,
于
2013
年
7—9
月各品种成熟期进行采摘
。
1郾 1郾 2摇
仪器与试剂
UV-2450
型紫外分光光度计
,
日本岛津公司
;
N-1100
型旋转蒸发仪
,
上海爱朗仪器有限公司
;
Tecan Infinite M200
型多功能酶标仪
,
瑞士
Tecan
科
技有限公司
;Folin - Ciocalteu
试剂
、
没食子酸
、
儿茶
素等试剂补充
Trolox(
水溶性维生素
E)、DPPH(1,
1鄄
二苯基
鄄2鄄
苦基苯肼
)、ABTS(2,2忆鄄
偶氮二异丁基
脒二盐酸盐
)
购自美国
Sigma
公司
,TPTZ(
三吡啶三
吖嗪
)
购自
Johnson Matthey
公司
。
1郾 2摇
实验方法
1郾 2郾 1摇
龙眼果肉游离态酚类物质的提取
参考
Zhang
等
[15 - 16]
的方法并稍作改进
。
准确
称取
100郾 0 g
不同品种的龙眼果肉在搅拌机内搅拌
3 min,
加入经
4 益
预冷的丙酮溶液
(
龙眼果肉与提
取剂
80%
丙酮的质量
( g)
与体积
( mL)
比例为
1颐 2),
于冰浴中采用组织匀浆机均质
3 min,
在
4 益
下
5 000 r / min
离心
5 min。
将果渣沉淀重复提取一
次
,
合并两次上清液于
45 益
下旋转蒸至无水状态
,
蒸馏水定容至
20 mL,
分装后在
- 80 益
保存备用
。
每个品种独立重复
3
次
。
1郾 2郾 2摇
龙眼果肉结合态酚类物质的提取
参考
Sun
等
[14,16]
的方法
,
并稍作改进
。
将
1郾 2郾 1
游离酚提取后的果渣沉淀物加入
20 mL 4
mol / L NaOH
溶液
,
氮气保护下振荡水解
1 h,
浓盐酸
中和至
pH
值为
7郾 0
后用乙酸乙酯萃取
6
次
,
合并
乙酸乙酯萃取相
,
在
45 益
下旋转蒸发至干
,
残余物
用蒸馏水定容至
10 mL, - 80 益
保存备用
。
1郾 2郾 3摇
总酚含量的分析
参考
Singleton
等
[17]
的方法测定
。
将制备的游离
酚
/
结合酚提取液用蒸馏水稀释
5 ~ 10
倍
,
取
0郾 5 mL
蒸馏水和
0郾 125 mL
已稀释的样品溶液到试管中
,
加
入
0郾 125 mL Folin -Ciocalteu
试剂
,
混匀
。
反应
6 min
后
,
依次加入
7 g / L
的
Na
2
CO
3
溶液
1郾 25 mL
和蒸馏
水
1 mL,
混匀
, 25 益
下避光反应
90 min
后
,
用紫外
分光光度计在
760 nm
波长下测定其吸光值
。
同时
以
0郾 125 mL
甲醇代替提取液作为空白对照
,
配置不
同浓度梯度的没食子酸标准品
,
制作标准曲线
。
总
酚含量结果以每
100 g
鲜果肉中所含的没食子酸质
量表示
,
简写为
mg / 100 g。
每个样品重复测定
3
次
。
12
第
34
卷 第
3
期
摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
林耀盛等
:
不同品种龙眼果肉酚类物质的抗氧化活性比较
