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吸附 24 mg 黄酮。 图 6( b) 为 40 mL 体积分数 70%
的乙醇溶液对 4 g 吸附后树脂进行解析的解析曲
线。 由图 6(b) 可知,AB-8 型大孔树脂能快速达到
解吸平衡,0郾 5 h 时解析率高达 80% 以上 , 解析
1 h 后解析率趋于稳定。 因此,在对苦荞粗黄酮进行
初步纯化时选定 AB-8 型大孔树脂吸附时间为 4 h,
解析时间为 1 h。 测得纯化后苦荞黄酮的纯度为
76郾 47% 。
2郾 5 摇 苦荞籽粒黄酮抗氧化分析
2郾 5郾 1 摇 苦荞籽粒黄酮清除 O -
2 ·的能力
图7 为邻苯三酚自氧化法测得的不同质量浓度
苦荞籽粒黄酮对 O -
2 ·的清除率。由图 7 可知,苦荞籽
粒黄酮清除 O -
2 ·的能力随着样品浓度的增大而增
大,在黄酮质量浓度为 150 滋g / mL 后清除率呈线性
关系上升。 说明苦荞籽粒黄酮对 O -
2 ·有一定的清除
效果,通过拟合方程计算其 IC50 值为 0郾 498 mg / mL,高
于抗坏血酸的 IC50 值 (0郾 139 mg / mL), 表明苦荞黄
酮对 O -
2 ·的清除能力低于抗坏血酸。
图 7摇 苦荞籽粒黄酮超氧离子自由基清除能力
Fig. 7摇 Superoxide anion radicals scavenging capabilities
of total flavonoids in seed of tartary
2郾 5郾 2摇 苦荞籽粒黄酮抗脂质过氧化的能力
图 8 是不同质量浓度苦荞籽粒黄酮和抗坏血酸
抗大豆卵磷脂过氧化能力的测定。 由图 8 可知, 随
着苦荞籽粒黄酮质量浓度的增大, 其对 Fe 2 + 引发的
卵磷脂脂质体过氧化的抑制作用有明显的上升趋
势。 黄酮类物质通过与铁离子进行螯合并清除氧化
过程产生的自由基和过氧化物来抑制大豆卵磷脂的
进一步氧化[17] ,因此苦荞籽粒黄酮能表现出较强的
抗脂质过氧化能力。 样品抗脂质过氧化能力 IC50 值
为 1郾 115 mg / mL, 略高于抗坏血酸 ( IC50 值 0郾 693
mg / mL),表明苦荞黄酮抗脂质过氧化能力略低于抗
坏血酸。
2郾 5郾 3摇 苦荞籽粒黄酮的还原力
样品的还原力和抗氧化活性有明显相关性[18] ,
苦荞籽粒总黄酮还原力测定依据样品能够提供电子
的数目和难易程度,图 9 为苦荞籽粒黄酮和抗坏血
图 8摇 苦荞籽粒黄酮抗脂质过氧化能力
Fig. 8摇 Lipid peroxidation inhibiting capability of total
flavonoids in seed tartary
酸还原力的测定结果。 由图 9 可知,在一定范围内 ,
苦荞籽粒黄酮的还原力随着浓度的升高而增大 ,表
明苦荞籽粒黄酮具有还原力 ,但其还原力低于抗坏
血酸,且随着二者浓度的升高,还原力差距变大 。
图 9摇 苦荞籽粒黄酮还原力
Fig. 9摇 Reducing abilities of total flavonoids in
seed of tartary buckwheat
2郾 5郾 4摇 苦荞籽粒黄酮清除 DPPH 自由基的能力
图 10摇 苦荞籽粒黄酮清除 DPPH 自由基能力
Fig. 10摇 DPPH scavenging capability of total flavonoids in
the seed of tartary buckwheat
图 10 和图 11 分别为不同质量浓度苦荞籽粒黄
酮和抗坏血酸溶液清除 DPPH 自由基的能力。 由图
10 可知, 苦荞籽粒黄酮在 30 滋g / mL 到 100 滋g / mL
随着黄酮浓度的增大 ,清除 DPPH 自由基的能力也
增大,之后保持平衡 , 清除率稳定在 90% 左右。 由
图 11 可知, 抗坏血酸为 10 滋g / mL 时对 DPPH 自由
基的清除率即达到了 90% 。 因此较高浓度的黄酮
溶液( 大于 100 滋g / mL) 对 DPPH 自由基的清除率接
近抗坏血酸 。 通过拟合方程计算的苦荞籽粒总黄酮
清除 DPPH 自由基的 IC50 值为 2郾 235 滋g / mL,说明所
提样品有比较强的清除 DPPH 自由基能力。
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第 33 卷 第 6 期摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 李摇 飞等: 苦荞籽粒黄酮的提取纯化及抗氧化活性研究