表
3摇
产蛋白酶菌复筛结果
Tab. 3摇 Re鄄screening results of protease鄄producing strains
菌种编号
M
B
P3鄄2
酶活
/ (U·mL
-1
)
26郾 23
13郾 90
48郾 50
2郾 2摇
产酶条件的研究
2郾 2郾 1摇
碳源对产酶的影响
在发酵产酶培养基中分别添加质量分数为
2%
的葡萄糖
、
蔗糖
、
蓖麻饼粕
、
麸皮
、
甘油
、
麦芽糖
、
乳
糖
、
淀粉作为不同的碳源
,32 益,180 r / min
发酵培养
一定时间后测定其中性蛋白酶活力
,
结果如图
2。
图
2摇
不同碳源对菌株
P3鄄2
产酶的影响
Fig. 2摇 Effect of different carbon sources on protease
production of strain P3鄄2
从图
2
可以看出
,
以麦芽糖作为培养基碳源时
,
酶活最高
,
其次是乳糖和甘油
。
易于被微生物利用
的葡萄糖作为碳源时
,
酶活最低
,
说明葡萄糖作为碳
源时对产酶有一定的抑制作用
,
可能是由于代谢产
物的阻遏作用
。
蓖麻饼粕是一种成分复杂的有机
物
,
其中能作为碳源的物质主要是粗纤维
,
产酶量低
说明以蓖麻饼粕作为培养基碳源不利于产酶
。
2郾 2郾 2摇
氮源对产酶的影响
分别以质量分数为
2%
的硫酸铵
、
蛋白胨
、
胰蛋
白胨
、
蓖麻饼粕
、
酵母膏
、
牛肉膏
、
硝酸钠作为培养基
唯一氮源
,
以麦芽糖为碳源
,
摇瓶发酵培养测定中性
蛋白酶活力
,
结果如图
3。
从图
3
可以看出
,
不同氮源对菌株
P3鄄2
产酶的
影响较大
。
其中
,
以蓖麻饼粕作为氮源时
,
蛋白酶活
性最高
,
其次为牛肉膏
、
蛋白胨
。
胰蛋白胨和酵母膏
用作氮源时
,
可能对产酶有阻遏作用
,
导致酶活偏
低
。
无机氮源硫酸铵和硝酸钠用作氮源时
,
菌株
P3鄄2
基本不产蛋白酶
。
已有很多以饼粕作为固态
发酵基质生产多种酶的研究报道
,
如食品级的淀粉
酶
、
纤维素酶
、
单宁酶
、
植酸酶等
[12 - 16]
。
图
3摇
不同氮源对菌株
P3鄄2
产酶的影响
Fig. 3摇 Effect of different nitrogen sources on protease
production of strain P3鄄2
2郾 2郾 3摇
金属离子对产酶的影响
在发酵产酶培养基中添加不同种类的金属离
子
,
以不添加任何金属离子为空白对照
,
测定中性蛋
白酶活力
,
结果如图
4。
图
4摇
不同金属离子对菌株
P3鄄2
产酶的影响
Fig. 4摇 Effect of different metal ions on protease
production of strain P3鄄2
从图
4
可以看出
,
金属离子对菌株
P3鄄2
产蛋白
酶有较大影响
。
与不添加任何金属离子相比
,
添加
Na
+
能促进产酶
,
其他金属离子均有一定的抑制作
用
,
特别是
Zn
2 +
对产酶抑制作用最大
。
2郾 2郾 4摇
Na
+
对产酶的影响
调整培养基中的
NaCl
质量分数分别为
0郾 1% ,
0郾 5% ,0郾 9% ,1郾 3% ,
摇瓶发酵培养
,
测定中性蛋白
酶活力
,
结果如图
5。
通常情况下
,
金属离子在低浓度范围内对产酶有
促进作用
,
超过一定范围就会抑制产酶
,
甚至对微生物
生长产生毒害作用
。
从图
5
可以看出
,NaCl
质量分数
在
0郾 1% ~0郾 9%
时
,
随着添加量的增加酶活也逐渐升
高
,
并在
0郾 9%
时达到最高
,
添加
1郾 3%
时酶活降低
。
2郾 2郾 5摇
培养基起始
pH
值对产酶的影响
将发酵产酶培养基的起始
pH
值分别调至
4郾 5,
54
第
33
卷 第
1
期
摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
王海涛等
:
可降解蓖麻饼粕的蛋白酶产生菌筛选及产酶条件优化
