第 卷 第 期
2015
年
1
月
食 品 科 学 技 术 学 报
Journal of Food Science and Technology
Jan. 2015
doi:10. 3969 / j. issn. 2095鄄6002. 2015. 01. 008
文章编号
:
2095鄄6002(2015)01鄄0043鄄06
引用格式
:
王海涛
,
王昌禄
,
李贞景
,
等
.
可降解蓖麻饼粕的蛋白酶产生菌筛选及产酶条件优化
[ J].
食品科学技术学报
,2015,
33(1):43 - 48.
WANG Haitao, WANG Changlu, LI Zhenjing, et al. Screening of protease鄄producing bacterium for degrading castor bean
meal and optimization of its fermentation conditions[J]. Journal of Food Science and Technology, 2015,33(1):43 - 48.
可降解蓖麻饼粕的蛋白酶产生菌筛选及产酶条件优化
王海涛
,
摇
王昌禄
*
,
摇
李贞景
,
摇
陈勉华
(
天津科技大学 食品营养与安全教育部重点实验室
,
天津
摇 300457
)
摘
摇
要
:
利用酪素平板透明圈法初筛和测蛋白酶活力复筛
,
从分离自蓖麻饼粕和实验室保存的菌
株中筛选出
1
株高产蛋白酶菌株
P3鄄2
,
对其产酶条件进行了研究
。
结果表明
,
最适碳源为麦芽糖
,
最适氮源为蓖麻饼粕
,
Na
+
对产酶具有促进作用
,
培养基初始
pH
值为
7郾 5
时出现产酶高峰
,
最适接
种量为
4%
,
培养到
36 h
和
84 h
时有两个产酶高峰
。
经正交试验优化
,
得到较佳产酶培养基组成
:
2郾 0%
麦芽糖
、
1郾 0%
蓖麻饼粕及
1郾 0%NaCl
。
关键词
:
蓖麻饼粕
;
蛋白酶
;
筛选
;
发酵
中图分类号
:
TS201郾 3摇 摇 摇 摇 摇
文献标志码
:
A
收稿日期
: 2014 01 17
作者简介
:
王海涛
,
男
,
硕士研究生
,
研究方向为食品生物技术
;
*
王昌禄
,
男
,
教授
,
博士生导师
,
主要从事食品生物技术方面的研究
。
通信作者
。
摇 摇
蓖麻饼粕是蓖麻籽榨油后的副产物
,
含有
75%
~ 78%
的有机质
,
粗蛋白含量在
30%
以上
,
是一种
潜在的优质蛋白饲料和有机肥料
[1]
。
处于生长期
的家畜
,
特别是乳猪幼猪
,
如以蓖麻饼粕为饲料
,
其
中偏高的蛋白质含量会造成幼猪消化不良
,
影响生
长
[2]
。
蓖麻饼粕作为肥料直接施于农田
,
其中的大
分子蛋白质不能直接被植物吸收利用
,
肥效缓慢
,
无
法满足作物生长对氮肥的需求
,
发酵时产生的热量会
造成作物烧根
、
烧种
[3]
。
为提高蓖麻饼粕的使用价值
,
科研人员多集中于研究蓖麻饼粕的脱毒处理
,
少见从
蓖麻饼粕中筛选产蛋白酶的微生物的研究报道
。
蛋白酶是能催化肽键水解的一群酶类
,
可将蛋
白质分解为多肽和游离氨基酸
[4 - 8]
。
蛋白酶既可以
从动植物组织中提取
,
也可以通过微生物发酵工艺
进行生产
[9]
。
微生物蛋白酶大约占全球总酶制剂
销量的
40%
[10]
。
随着蛋白酶应用的日趋广泛和需
求的日益增多
,
分离筛选能分泌具有良好酶学特性
并适用大规模工业生产的蛋白酶高产菌株
,
是广大
科研人员的研究目标和任务
。
为提高蓖麻饼粕的使用价值
,
可筛选高产蛋白
酶的菌株发酵蓖麻饼粕
,
将其中的蛋白质分解为小
分子的多肽和游离氨基酸
,
制成高质量的生物饲料
、
生物肥料
。
本实验从蓖麻饼粕中分离筛选出一株高
产蛋白酶菌株
,
并对其产酶条件进行了初步研究
,
为
其在生产中的应用奠定基础
。
1摇
材料与方法
1郾 1摇
实验材料
供试菌株
P3鄄2
系从蓖麻饼粕中分离出的具有
蛋白酶活力的菌株
;
蓖麻饼粕
,
天津科技大学食品生
物技术实验室保存
;
麸皮
,
市售
;
干酪素购自上海紫
一试剂厂
;
福林酚购自北京索莱宝科技有限公司
;
其
他用作培养基配制试剂均分析纯
,
购自天津市北方
天医化学试剂厂
。
1郾 2摇
培养基
1)
牛肉膏蛋白胨培养基
:
牛肉膏
3 g、
蛋白胨
10
g、
氯化钠
5 g、
琼脂
20 g,
自来水
1 000 mL,pH
值为
7郾 2 ~ 7郾 4。
2)
蛋白酶选择性培基
:NaNO
3
2 g,K
2
HPO
4
1 g,
KCl 0郾 5 g,MgSO
4
·7H
2
O 0郾 5 g,FeSO
4
·7H
2
O 0郾 01 g,
34
