定性提高
,
热变性失活速率下降
。
风味蛋白酶固定
化后
,
较适
pH
值向偏碱的方向移动
。
游离酶在
pH
值
7郾 0
时酶活力较高
,
且较适
pH
值范围较窄
;
而固
定化酶在
pH
值
8郾 0
时酶活力较高
,
且在
pH
值
7郾 5 ~
9郾 0
的范围内均能保持较高的酶活力
。
2郾 2郾 2摇
固定化酶的储存稳定性与操作稳定性
与游离蛋白酶相比
,
固定化风味蛋白酶具有较
好的储存稳定性与操作稳定性
,
如图
7。
游离酶储存
10 d
后酶活力损失
95%
以上
,
而固
定化酶储存
10 d
后
,
酶活力仅损失
30% ,
储存
30 d
后酶活力仍残留
51郾 9% 。
风味蛋白酶固定化后可
以反复多次使用
,
并表现出较好的操作稳定性
。
重
复使用
5
次
,
酶活力仅损失
16% ,
重复使用
11
次
,
残留酶活力仍为
56郾 7% ;
同时
,
球形载体仍保持较
好的韧性
,
未见有破碎或变形现象
。
良好的储存与
操作稳定性
,
有利于固定化风味蛋白酶在食品工业
中的推广与应用
,
可以延长使用时间
、
增加使用次
数
,
降低生产成本
。
图
7摇
固定化风味蛋白酶的储存稳定性与操作稳定性
Fig. 7摇 Storage and operational stability of immobilized flavourzyme
3摇
结
摇
论
可用于制备固定化酶的载体很多
,
但壳聚糖载
体由于化学性质稳定
,
机械强度高
、
比表面积较大
、
孔隙率高
、
内扩散阻力小
,
被认为是较有工业应用潜
力的固定化酶载体
[17]
。
以壳聚糖为载体
、
戊二醛为
交联剂
,
采用共价交联法制备固定化风味蛋白酶的
较适条件为
棕
(
壳聚糖
) = 2郾 5% 、
棕
(NaOH) = 3% 、
棕
(
戊二醛
) = 0郾 5% ,
交联时间
6 h,
载体中酶的质量
分数
40 mg / g
载体
,
于
35 益、pH 5郾 5
条件下固定化
反应
10 h。
固定化后
,
风味蛋白酶较适反应温度从
50 益
提高至
70 益,
较适
pH
值从
7郾 0
提高至
8郾 0,
且
可保持较高酶活力的温度与
pH
值范围均有所
扩大
。
固定化风味蛋白酶保持了游离酶的高效
、
专一
及温和的酶催化特性
,
具有良好的储存稳定性和操
作稳定性
,
可反复多次使用
,
分离回收容易
,
使用效
率高
;
酶反应过程可以控制
,
大大简化了生产工艺
,
适宜于在工业生产中推广应用
。
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13
第
33
卷 第
4
期
摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
师广波等
:
壳聚糖固定化风味蛋白酶的制备及其酶学特性
