图
1摇
不规则形状的壳聚糖载体
Fig. 1摇 Irregular shape chitosan carriers
摇 摇
当
棕
(
壳聚糖
) = 2郾 5% 、
棕
(NaOH) = 3%
时
,
所
形成的壳聚糖载体呈规则球形
,
机械强度大
,
再增加
壳聚糖质量分数
,
会出现拖尾现象
,
而再增加
NaOH
质量分数
,
对载体的形状和机械强度的影响不再明
显
。
因此选择
棕
(
壳聚糖
) = 2郾 5% 、
棕
(NaOH) = 3%
为较佳浓度
。
2郾 1郾 2摇
戊二醛质量分数和载体活化时间的影响
交联剂戊二醛的质量分数与壳聚糖载体的活化
时间影响载体上活性基团数量
,
从而影响其固定化
能力
。
戊二醛质量分数与活化时间对载体固定化能
力的影响结果如图
2。
图
2摇
戊二醛质量分数与活化时间对固定风味蛋白化酶相对活力的影响
Fig. 2摇 Effects of glutaraldehyde concentration and activation time on relative activity of immobilized flavourzyme
摇 摇
棕
(
戊二醛
) = 0郾 5%
时
,
固定化酶的活力较大
,
再增大戊二醛的质量分数
,
酶活力反而下降
。
其原
因是戊二醛质量分数较小时
,
壳聚糖载体上的活性
基团数量少
,
固定化能力低
;
但戊二醛质量分数过高
时
,
壳聚糖分子上的氨基与戊二醛发生分子内或分
子间交联
,
导致载体与酶的结合能力降低
。
随着活
化时间的延长
,
载体偶联的戊二醛数量增加
,
固定化
能力增强
,
并在第
6 h
时达到较大值
,
此时
,
偶联反
应已经平衡
,
再增加活化时间
,
载体上偶联的戊二醛
数量不再增加
。
2郾 1郾 3摇
载体中酶的质量分数对固定化酶活力的影响
载体中酶的质量分数对固定化酶活力的影响如
图
3。
由图
3
知
,
固定化酶活力随着载体中酶的质量
分数的增加而逐渐增大
,
并在载体中酶的质量分数
为
40 mg / g
载体时达到较大值
,
此后
,
再增加载体中
酶的质量分数
,
固定化酶活力的变化趋于平缓并有
不同程度的下降
。
其原因是载体上的活性基团数量
是一定的
,
当活性位点被酶分子全部占据后
,
再增加
图
3摇
载体中酶的质量分数对固定化酶活力的影响
Fig. 3摇 Effect of enzyme dosage on relative activity of
immobilized flavourzyme
载体中酶的质量分数
,
被固定的酶分子数量不再增
加
,
且过多的酶分子会在载体网格内聚集
,
产生空间
位阻
,
影响酶与底物的正常结合
,
另一方面也会对固
定化蛋白酶有一定的水解作用
,
从而导致固定化酶
活力下降
[16]
。
2郾 1郾 4摇
固定化反应时间的影响
固定化时间对固定化酶活力的影响如图
4。
92
第
33
卷 第
4
期
摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
师广波等
:
壳聚糖固定化风味蛋白酶的制备及其酶学特性
