1郾 2摇
仪器与设备
基质辅助激光解析串联飞行时间质谱仪
(MAL鄄
DI鄄TOF鄄MS),
美国布鲁克公司
;
血生化自动分析仪
,
日本光电公司
;
大鼠血清铁蛋白试剂盒 德国
IBL
公
司
;HM315
型美康切片机
,
德国美康公司
; Image
PLUS
型光镜系统
,
美国
Media Cybernetics; 滋CT40
型微计算机断层扫描仪
,
瑞士
SCANCO MEDICAL
公司
。
1郾 3摇
方法
1郾 3郾 1摇
动物分组
120
只大鼠
(
体重
220 ~ 235 g)
适应环境一周
(12 h
交替光照
,25 依 2 益,55% 依 10%
湿度
),
后随
机分为
4
组
:
对照组
( control, CON)、
高铁组
( iron
overload,IO)、
模拟失重组
( simulated weightlessness,
SW)、
高铁
+
模拟失重组
( IO + SW)。
铁过载模型
和模拟失重模型建立好后
(
即实验进行第
11
天时
)
每组随机选取
10
只大鼠
,
用于检测模型建立是否成
功
。
每组剩余的
20
只大鼠再次随机分为两组
,
其中
一组灌胃原花青素
( + OPC),
另外一组灌胃生理盐
水以对照
( + saline)。
大鼠单笼饲养
,
饲喂基础饲
料
,
每
3
天称重一次
,
共
7
次
。
1郾 3郾 2摇
高铁模型建立
采用右旋糖酐铁腹腔注射
,100 mg / (kg·
体重
),
每两天一剂
,
共
5
剂
。
非高铁组腹腔注射等体积的
生理盐水以对照
。
1郾 3郾 3摇
模拟失重模型建立
采用尾悬吊
( - 30毅)
以使后肢去负荷
,
每只笼
子悬吊一只大鼠
,
非模拟失重组的大鼠自由活动
。
实验过程中大鼠可以自由取食
、
取水
。
1郾 3郾 4摇
原花青素处理
模型建好
(
实验第
11
天
)
后
,
用大鼠饮用水将
购得的原花青素溶解
,
采用灌胃方式给予
。
剂量为
40 mg / (d·( kg·
体重
)
- 1
),
非原花青素处理组大鼠
灌胃同体积的饮用水作为对照
。
1郾 3郾 5摇
血液指标测定
大鼠麻醉后利用心脏取血的方法
,
取大鼠全血
。
将部分全血收集到血清采集瓶中
,
离心
(3 500 r / min,3
min)
得到血清
。
血清样品
,
分别采用血生化自动分
析仪进行血常规检测和大鼠铁蛋白试剂盒进行血清
铁蛋白检测
,
采用
MALDI鄄TOF鄄MS
进行铁调素含
量
[11]
检测
。
1郾 3郾 6摇
肝脏铁染色
取肝脏组织
,
用
4%
多聚甲醛溶液和
10%
福尔
马林液固定组织标本
,
后经包埋
,
切片
,
普鲁士蓝染
色
,
使用光镜观察
。
1郾 3郾 7摇
股骨测定
取大鼠股骨
,
利用微计算机断层扫描技术进行
检测
[12]
。
分析得到股骨的骨体积分数
,
骨小梁数
量
、
骨小梁厚度和骨小梁间隙
。
1郾 3郾 8摇
数据处理
所有计量资料均采用平均数
依
标准差
(mean 依
SD)
表示
。
利用
IBM SPSS Statistics 19
进行数据分
析
。
采用单因素
ANOVA
分析及
SNK
比较组间差
异
。
参照水准以
P
< 0郾 05
具有统计学意义
。
2摇
结果与分析
2郾 1摇
模型建立
在实验进行第
10
天时对大鼠体重进行统计
,
结
果如图
1。
铁过载模型
(IO)、
模拟失重模型
(SW)
以
及高铁与模拟失重模型
( IO + SW)
中大鼠的平均体
重均低于对照组
( CON)。
其中铁过载模型中大鼠
的平均体重略低于对照组
,
但是和对照组无显著性
差异
(
p
> 0郾 05);
模拟失重组大鼠的平均体重显著
低于对照组
(
p
< 0郾 05);
而高铁与模拟失重模型中
大鼠的平均体重显著低于模拟失重组
。
图
1摇
大鼠体重记录结果
Fig. 1摇 Bodyweight of rats
在实验进行第
10
天时对大鼠血液指标进行统
计
,
结果如表
1。
从血红蛋白浓度
( Hemoglobin,
HGB)
可见
,
铁过载处理组和高铁与模拟失重模型
处理组的血红蛋白水平显著高于对照组
(
分别升高
6%
和
7% ,
均
p
< 0郾 05),
而模拟失重组的大鼠血红
蛋白指标和对照组无显著性差异
(
p
> 0郾 05)。
从血
清铁蛋白浓度
( Serum Ferritin,FE)
可见
,
铁过载处
理组大鼠血清铁蛋白含量显著高于对照组
73%
62
食品科学技术学报
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摇 2015
年
1
月
