率的影响极显著
(
P
< 0郾 01),
一次项
X
2
对收率的影
响显著
(
P
< 0郾 05),
其余各项对收率的影响不显著
(
P
> 0郾 05)
.
用
Design Expert 7郾 1
软件绘制温度与
pH
值对
DPPH
自由基清除率和收率交互影响的响
应面图
,
如图
6
.
将
DPPH
自由基清除率和收率同时
设为最大值进行优化求解
,
模型预测的
3
个因素的
编码值分别为
X
1
= - 1郾 0、
X
2
= 0郾 32、
X
3
= - 0郾 83,
与其对应的真实值分别为温度
50 益,pH
值
8郾 54,
底
物质量分数
8郾 34
% .
在此优化条件下
,DPPH
自由
基清除率的理论最大值为
28郾 34
%
,
收率的理论最
大值为
65郾 49
% .
为了验证实验的可行性
,
在最优条
件下进行
3
次实验验证
,DPPH
自由基清除率的真
实值为
25郾 77
%
依 0郾 57
%
,
收率的真实值为
65郾 80
%
依 0郾 46
%
,
均与理论最大值相差较小
,
说明两个模型
是合适的
.
表
3摇
二次回归模型的回归分析结果
Tab. 3摇 Regression analysis results of quadratic
regression models
方差源
DPPH
自由基清除率
收率
系数
F
值
Prob
>
F
系数
F
值
Prob
>
F
Model
9郾 51 0郾 003 6
**
7郾 05 0郾 008 7
**
X
1
0郾 73 2郾 77 0郾 139 7 - 1郾 84 26郾 38 0郾 001 3
**
X
2
2郾 82 41郾 30 0郾 000 4
**
1郾 06 8郾 65 0郾 021 7
*
X
3
- 1郾 52 11郾 95 0郾 010 6
*
- 1郾 41 15郾 45 0郾 005 7
**
X
1
X
2
1郾 77 8郾 11 0郾 024 8
*
- 0郾 093 0郾 033 0郾 860 5
X
1
X
3
0郾 026 0郾 002 0郾 967 9 0郾 55 1郾 16 0郾 316 3
X
2
X
3
- 0郾 40 0郾 42 0郾 539 1 1郾 03 4郾 14 0郾 081 3
X
2 1
0郾 78 1郾 65 0郾 239 5 0郾 49 0郾 98 0郾 356 3
X
2 2
- 1郾 87 9郾 53 0郾 017 7
*
- 1郾 09 4郾 83 0郾 063 9
X
2 3
- 1郾 87 9郾 55 0郾 017 6
*
0郾 73 2郾 20 0郾 181 7
失拟项
0郾 45 0郾 729 7
0郾 97 0郾 489 9
摇 摇
注
:“*冶
表示在
95
%
置信区间内显著
,“**冶
表示在
99
%
置信
区间内显著
图
6摇
温度和
pH
值对花生肽的
DPPH
自由基清除率与收率影响的响应面分析结果
Fig. 6摇 Response surface analysis of influence of temperature and pH on DPPH radical scavenging ability and yield
3摇
结
摇
论
花生肽的抗氧化性受蛋白酶的种类
、
水解温度
、
pH
值
、
底物浓度
、
酶底比
( E / S)
和水解时间等工艺
条件的影响
,
优化工艺条件可显著提高花生肽的抗
氧化性
.
以
DPPH
自由基清除率和收率为响应值
,
采用响应面法对复合酶法水解花生粕生产抗氧化性
肽的工艺条件进行了优化
,
研究结果表明
,
碱性蛋白
酶和中性蛋白酶对花生粕具有较强的水解能力
,
二
者以
2颐 1
的比例对花生粕水解时
,
较优水解条件是
50 益,pH
值为
8郾 54,
底物质量分数为
8郾 34% .
在此
条件下酶解
16 h,
花生肽的收率为
65郾 80% ,
在花生
肽质量浓度为
0郾 55 mg / mL
时
,
对
DPPH
自由基清除
率为
25郾 77% ,
与优化前相比
,
复合酶比碱性蛋白酶
单酶水解时收率和自由基清除率分别提高了
7郾 48%
和
7郾 66% ,
比中性蛋白酶单酶水解时分别提
高了
10郾 29%
和
22郾 53% .
花生肽的抗氧化性与水
解度有关
,
但并不是水解度越高抗氧化性越强
,
水解
过程宜以抗氧化能力作为主要控制指标
,
而不是简
单地提高水解度
.
水解温度与
pH
值对花生肽的抗
氧化性存在交互影响
,Box鄄Behnken
试验设计和响
应面分析法可以充分阐释这种交互作用对实验结果
的影响
,
适用于对花生粕酶解过程的优化
.
参考文献
:
[1]摇 Su Guowan, Ren Jiaoyan, Yang Bao, et al. Comparison
of hydrolysis characteristics on defatted peanut meal pro鄄
teins between a protease extract from
Aspergillus oryzae
36
第
32
卷 第
3
期
摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
刘红梅等
:
复合酶法水解花生粕制备抗氧化肽的工艺优化