70 - 食品科学技术页
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1郾 4郾 2摇
MS / MS
条件
ESI [M鄄H]
-
模式
;MRM
多反应监测
;
电喷雾电
压
3 kV,
离子源温度
100 益;
去溶剂温度
400 益 . 4
种杀鼠剂分子量
、
保留时间
、
离子对
、
锥孔电压
、
碰撞
能量见表
1.
表
1摇 4
种杀鼠剂分子量
、
保留时间
、
离子对
、
锥孔电压
、
碰撞能量
Tab. 1 Molecular weights, retention times, ion pairs, cone
voltages and collision energies of four rodenticides
序号 名称
保留时
间
/ min
母离子
(m / z)
子离子
(m / z)
锥孔
电压
/ V
碰撞
能量
/ eV
1
灭鼠灵
3郾 37 307郾 1 161
*
250
45
45
20
25
2
杀鼠迷
3郾 61 291郾 1 141
*
93
45
45
45
25
3
溴鼠灵
5郾 06 521郾 2 135
*
143
65
65
45
40
4
氟鼠酮
4郾 63 541郾 3 161
*
289
60
60
45
40
摇 摇
注
:*
为定量离子
2摇
结果与分析
分析步骤与
BS EN 15662:2008
[22]
检测蔬菜水
果中的农药残留步骤相同
,
区别在于所用的是
Dis鄄
Que
提取管和净化管
. QuEChERS
法要求蔬菜
、
水果
中的水分含量一般应大于
80% ,
否则需要加入适量
的水
,
使水分含量在
80% ~ 90%
左右
.
而实验中蔬
菜
、
水果的含水量都大于
85% ,
满足要求
.
2郾 1摇
色谱条件和质谱条件的优化
使用
UPLC鄄MS / MS
分析速度快
、
灵敏度高
,
已
作为分析痕量农药残留的首选
.
电喷雾正
、
负离子
检测方式下
,
都能同时检测到该
4
种待测物
,
但在负
离子模式下
,
基线噪声低
、
信噪比高
,
故选择
ESI
源
负离子
MRM
模式进行监测
.
根据液质定性分析规
则
,
确证应选择
1
个母离子
,2
个定性离子
.
我们选
择
2
对分子离子峰
,
设定合适的峰保留时间
,
并确保
色谱峰的采样点数在
20
个点
,
从而得到较好的定量
重复性
.
优化后的质谱参数见表
1.
由于较高比例
的甲醇流动相直接梯度洗脱效果不佳
,4
种杀鼠剂
分离度差
,
因此在梯度洗脱初期保持
5 mmol / L
乙酸
胺
-
甲醇
(60颐 40,
V / V
)
流动相冲洗约
3 min,
确保目
标物在液相柱上获得吸附保留
,
然后再用高比例的
甲醇一次梯度洗脱
,
获得满意的分离效果
.
2郾 2摇
样品前处理方法
由于
4
种杀鼠剂都较难溶于水
,
在非极性溶剂
苯
、
正己烷等溶解度低
,
在丙酮
、
二氯甲烷
、
甲醇
、
乙
酸乙酯等极性较强有机溶剂中溶解度好
.
实验发现
丙酮和乙酸乙酯提取时
,
提取液中的色素等杂质较
多
,
造成的基质效应高
,
而乙腈的极性接近甲醇
,
且
采用乙腈提取回收率高
,
也适用于液相色谱质谱系
统
.
用商品化的提取管和净化管处理样品效率高
、
试剂用量少
、
环保
,
最后选用
QuEChERS
法
.
2郾 3摇
基质标准曲线
蔬菜
、
水果含色素较多
,
如叶绿素
、
叶黄素
、
花青
素
、
类胡萝卜素等
,
会造成较强的基质效应
.
利用
QuEChERS
法前处理后
,
发现有基质增强效应
.
分
别实验了白菜和黄瓜样品中
3
个浓度梯度加标回
收
,
平行测定
3
次
.
加标回收率多在
96% ~ 140% ,
个别的达
144% ~ 164% ,
相对标准偏差也多超过
10% .
降低基质效应常用的方法是配制基质标准曲
线
,
我们实验用空白基质做标准曲线
,
测定了白菜的
加标回收
,
回收率明显下降
. 4
种目标物的加标回
收率分别为
76郾 7% , 96郾 7% , 121%
和
101% ,
R
2
在
0郾 990 ~ 0郾 995
之间
,
但对含叶绿素较多的黄瓜样
品
,
空白基质曲线的效果并不理想
.
分析原因
,
主要
是含有
PSA
的净化管净化不充分
.
2郾 4摇
石墨化碳黑对基质效应的影响
PSA
是氨基吸附剂
,
属一种弱阴离子交换吸附
剂
,
能通过氢键去除脂肪酸
、
糖类及其他基质共萃取
物
[24]
.
净化管中
PSA
可净化提取液
,
但单一的
PSA
填料对色素的去除能力较弱
. GCB
是一种经过高温
处理的碳黑材料
,
表面有光滑
、
无孔的石墨晶型结
构
,GCB
对含有芳香环
、
结构具有一定对称性和平
面的农药分子吸附力最强
,
对叶绿素
、
叶黄素
、
番茄
红素和胡萝卜素等极性强的色素都有很强的吸
附
[25]
,
而
C18
硅胶粉去除色素的效果不如
GCB.
C18
柱除色素的效果不如
Carb
柱
,
不过
C18
可以除
去极性样液中的非极性杂质
.
对于像黄瓜这种含叶绿素高的样品
,
发现只用
净化管自带的
PSA,
效果不理想
,
除溴鼠酮外
,
灭鼠
灵
、
杀鼠迷
、
溴鼠灵
,
回收率达
139% ~ 166% .
分别
实验了补加
PSA
和
GCB
来去除色素
、
降低基质效
应
,
结果见图
1.
首先
,
实验增加
PSA
用量对加标回
收的影响
.
原净化管中含
PSA 50 mg,
再增加
PSA
的
76
第
32
卷 第
3
期
摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
宋
摇
薇等
: QuEChERS鄄UPLC鄄MS / MS
测定果蔬中
4
种残留抗凝血杀鼠剂
