白酶和中性蛋白酶均可用于花生肽的生产
.
鉴于不
同蛋白酶的水解位点不同
,
本研究将碱性蛋白酶
与中性蛋白酶按
2颐 1
的比例混配成复合酶
,
对花生
粕进行水解
,
以提高花生肽的水解度
、
收率和抗氧
化性
.
图
1摇
不同蛋白酶对花生肽的
DPPH
自由基清除率和
收率的影响
Fig. 1摇 Effect of different proteases on DPPH radical
scavenging ability and yield of peanut peptides
2郾 2摇
蛋白酶用量对花生肽的
DPPH
自由基清除
率
、
收率与水解度的影响
图
2摇
蛋白酶用量对花生肽的
DPPH
自由基清除率
、
水解度和收率的影响
Fig. 2摇 Effect of dosage of proteases on DPPH radical
scavenging ability, degree of hydrolysis,
and yield
蛋白酶用量对花生肽的
DPPH
自由基清除率
、
水解度与收率的影响如图
2.
由图
2
可见
,
蛋白酶的
质量分数从
1% (E / S)
增至
3% (E / S)
时
,DPPH
自
由基清除率
、
水解度和收率增加较快
;
但继续增加酶
量
,
三者增加的速度变缓
.
其原因是蛋白酶用量较
低时
,
增加用量可增大酶和底物结合频率
,
加快水解
速度
,
使水解度
、
抗氧化能力和收率迅速增大
;
当蛋
白酶用量较高时
,
酶的浓度不再是水解反应的限速
因素
,
再增加酶量
,
水解速度不再显著增加
.
综合考
虑抗氧化性
、
收率和生产成本
,
选择
3% (E / S)
为较
佳蛋白酶用量
.
2郾 3摇
温度对花生肽的
DPPH
自由基清除率
、
收率
与水解度的影响
温度对花生肽的
DPPH
自由基清除率
、
收率与
水解度的影响如图
3.
由图
3
可见
,
温度较低时
,
随
着温度的升高
,
收率与水解度逐渐增大
,
至
50 益
达
到最大值
,
此后
,
再升高温度
,
收率与水解度反而下
降
.
当温度从
45 益
增至
50 益,DPPH
自由基清除率
显著上升
;
从
50 益
增至
60 益
时
,DPPH
自由基清除
率缓慢上升
;
从
60 益
增至
65 益
时
,DPPH
自由基清
除率再一次显著上升
,
这说明其变化趋势与水解度
并不一致
.
相关研究证明
,
蛋白酶解物的抗氧化性
与水解度有关
,
但并非水解度越高
,
抗氧化性越
强
[6,11]
.
因此
,
抗氧化肽的生产工艺的优化
,
宜以其
抗氧化性为响应值
,
而不能简单地以提高水解度为
目的
.
综合抗氧化性和收率
,
本研究选择
55 益
为较
佳反应温度
.
图
3摇
温度对花生肽的
DPPH
自由基清除率
、
水解度和
收率的影响
Fig. 3摇 Effect of temperature on DPPH radical scavenging
ability, degree of hydrolysis, and yield
摇
2郾 4摇 pH
值对花生肽的
DPPH
自由基清除率
、
收率
与水解度的影响
pH
值对花生肽的
DPPH
自由基清除率
、
收率与
水解度的影响如图
4.
由图
4
可见
,pH
值较低时
,
增
加
pH
值
,
收率显著上升
,pH
值
7郾 0
后再增加
pH
值
,
收率的增加不再显著
.
在
pH
值为
6郾 3 ~ 10郾 0
时
, DPPH
自由基清除率与水解度有随着
pH
值增
加而一直增大的趋势
.
鉴于在较高
pH
值条件下水
解时需消耗大量的
NaOH,
水解后中和还需消耗大
量的
HCl,
产品盐分也较高
,
需增加脱盐工序
,
成本
高
,
且存在环境污染
,
本研究选用
pH
值为
8郾 0
作为
最适
pH
值
,
在该
pH
值下酶解
,
初始
pH
值调节时碱
的消耗量小
,
反应结束时
pH
值已降至中性
,
不需再
用
HCl
中和
,
产品盐分含量较低
,
无需进行脱盐
.
16
第
32
卷 第
3
期
摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
刘红梅等
:
复合酶法水解花生粕制备抗氧化肽的工艺优化