69 - 食品科学技术页

少. 宓捷波等采用乙腈提取,碱性氧化铝小柱净化,
高效液相色谱-串联质谱(LC鄄MS / MS) 分析了蔬菜、
水果中 4 种灭鼠剂[13] 和超高效液相色谱-串联质谱
( UPLC鄄MS / MS ) 检测食品中 11 种灭鼠剂的方
法 [14] , 但其前处理方法较繁琐, 耗用试剂较多 , 不
太适合大批量样品的快速检测. Osman 等[15] 用丙
酮提取, 固相萃取小柱净化, 气相色谱 - 质谱检测 8
种蔬菜的 23 种农药残留 ( 包括杀虫剂、 杀菌剂 、 除
草剂和杀鼠剂), 结果发现杀鼠灵在黄瓜和卷心菜
中有检出. 常见分析动物样本中杀鼠剂残留的前处
理方法有液液萃取 [10 - 12] 、QuEChERS [12] 等 ; 分析蔬
菜、 水果中杀鼠剂前处理主要以液液萃取, 固相萃取
柱富集净化[13 - 15] 等方法; 分析手段以 GC鄄MS[15] 、
HPLC[9,12] 、LC鄄MS 或 LC鄄MS / MS[9 - 11,13 - 14] 为主.
传统的液液萃取,固相萃取柱富集净化 ,前处理
步骤长、 效率低、耗费大量溶剂. 2003 年 Anastassia鄄
des 等 [16] 开发了一种农药多残留分析的 QuEChERS
法(quick, easy, cheap, effective, rugged,safe) . 该
方法是基于分散固相萃取 (dispersive solid phase ex鄄
traction, DSPE) 进化而来. DSPE 方法结合 GC鄄MS
和 LC鄄MS / MS 已经广泛应用到蔬菜、水果、 粮食等多
种食品中农药残留[17 - 18] 、 生物碱 [19] 、 真菌毒素残
留 [19] 等物质的检测. 针对不同基质和检测项目, 研
究者推出多种优化方案[20] , 如改变取样量、 提取溶
剂、 净化材料和浓缩净化液等. 根据 QuECHERS 法
检测果蔬中多种农药残留的美国分析化学家组织
(AOAC)2007郾 01 方法 [21] 和欧洲标准化委员会 EN
15662:2008 方法 [22] 己被广泛采用. 我国 NY / T
1380—2007 检测果蔬中 51 种农药残留的方法也使
用了 QuEChERS鄄GC / MS 法 [23] .
随着人们对果蔬的食用安全越来越关注 ,许多
大型连锁超市也提出农产品质量控制体系 ,加强了
对抗凝血杀鼠剂检测 ,我国暂没有检测果蔬中 4鄄羟
基香豆素类抗凝血杀鼠剂的国家标准和行业标准方
法. 本文选择了 4鄄羟基香豆素类抗凝血灭鼠剂中典
型的第 1 代和第 2 代杀鼠剂中灭鼠灵、 杀鼠迷、溴鼠
灵、 氟鼠酮等 4 种杀鼠剂来研究蔬菜、水果中杀鼠剂
多残留的检测方法. 采用 QuEChERS 法进行前处
理, 利用 UPLC鄄MS / MS 进行定量检测.
1摇 材料与方法
1郾 1摇 材料与试剂
甲醇,乙腈 ,色谱纯 ,美国 Fisher 公司; 乙酸铵,
色谱纯 ,日本 TCI 公司.
杀鼠迷 (CAS 5836鄄29鄄3),质量分数为 98郾 0% ;
灭鼠灵 (CAS 81鄄81鄄2),质量分数为 98郾 0% ; 溴鼠灵
(CAS 56073鄄10鄄0),质量分数为 96郾 0% ; 氟鼠酮, 又
称氟鼠灵(CAS 90035鄄08鄄8), 质量分数为 98郾 0% ,标
准品均购自德国 Dr. Ehrenstorfer GmbH 公司.
超纯水采用 Mill鄄Q 型超纯水机制备, 美国 Milli鄄
pore 公司. 实验用的白菜、黄瓜、 苹果、猕猴桃、 木瓜
等果蔬 ,均购自于北京某大型超市.
实验中采用 DisQue 提取管和净化管套装, 美国
Waters 公司;DisQue 提取管是 50 mL 离心管中预装
1郾 5 g 无水乙酸钠和 6 g 无水硫酸镁;净化管是 2 mL
离心管中预装入 150 mg 无水硫酸镁和 50 mg 的氨
基吸附剂 N鄄丙基乙二胺键合硅胶(primary secondary
amine, PSA);PSA,粉状,天津艾杰尔公司;石墨化炭黑
(graphitized carbon black, GCB) 粉,美国 Waters 公司.
标准溶液配制是分别称取适量的标准品 , 甲醇
溶解, 定容得 1 000 mg / L 标准贮备液 (4 益 储存 ) .
配置合适浓度的标准中间液 , 再经甲醇逐级稀释得
到相应的标准工作液 . 基质标准溶液的配制是利用
阴性样品用乙腈提取 ,经离心后的提取液净化后, 配
制系列基质标准曲线工作溶液 .
1郾 2摇 仪器与设备
ACQUITY TQD 型 UPLC鄄MS / MS( 配有 ESI 源 ),
美国 Waters 公司;Vertex Genie 型涡旋混合器 , 美国
Scientific Industries 公司;Mill鄄Q 超纯水器 ;Philips 家
用粉碎机.
1郾 3摇 提取方法
测试样品去表面明显的土壤和其他杂质 , 不清
洗 ,粉碎匀浆. 取样 10郾 0 g( 精确到 0郾 001 g), 加入
到 50 mL 提取管中, 加入含乙酸体积分数 1% 的乙
腈 ,加盖迅速摇匀, 涡旋混匀 1 min, 于 4 000 r / min
离心 5 min; 取 1郾 5 mL 上清液, 加入到净化管中, 混
合震荡涡旋 1 min. 如果需要再加入 PSA 或 GCB 吸
附剂, 则再涡旋混匀 1 min,于 4 000 r / min 离心 , 取
上清液 ,过 0郾 22 滋m 滤膜, 上机待测. 外标法定量.
1郾 4摇 分析方法
1郾 4郾 1摇 色谱条件
ACQUITY UPLC BEH 型 C18 色谱柱 (2郾 1 mm 伊
100 mm, 粒径 1郾 7 滋m). 流速 0郾 25 mL / min,柱温 40 益.
流动相 A 是甲醇 ,流动相 B 是含 5 mmol / L 乙酸铵
和含体积分数 0郾 1% 甲酸的水溶液. 梯度洗脱条件:
0 ~ 3郾 0 min 40% A, 3郾 0 ~ 5郾 5 min 90% A, 5郾 5 ~
66 食品科学技术学报 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2014 年 5 月