81 - 食品科学技术学报页

公司;2489 型紫外可见光检测器 ,美国 Waters 公司;
Symmertry Shield RP18 型色谱柱(4郾 6 mm 伊 150 mm,
5郾 0 滋m), 美国 Waters 公司 ;UV-9000S 型双光束紫
外可见分光光度计, 上海元析仪器有限公司;TGL -
20M 型台式高速离心机, 上海卢湘仪离心机仪器有
限公司.
1郾 3摇 方法
1郾 3郾 1摇 色谱条件
流动相为乙腈与 0郾 02 mol / L 磷酸氢二铵 ( 体积
比为 30颐 70),流速为 1 mL / min,进样量 10 滋L,柱温
30 益, 紫外检测器波长 218 nm. 以保留时间定性,
峰面积定量.
1郾 3郾 2摇 样品处理
称取 10 g 姜酒样品( 精确至 0郾 001 g) 加热除乙
醇后置于离心管中, 加入 40 mL 乙腈, 涡旋混匀
3 min, 于 10 000 r / min 的转速下离心 10 min. 取上清
液 5 mL 置于 10 mL 容量瓶中,用纯水定容 ,混匀,经
0郾 22 滋m 滤膜过滤,滤液待测.
2摇 结果与分析
2郾 1摇 色谱条件的优化
2郾 1郾 1摇 检测波长的选择
利用紫外可见分光光度计对纽甜标准品溶液在
波长 190 ~ 350 nm 范围内进行扫描,结果见图 1.
图 1摇 纽甜紫外可见分光光谱
Fig. 1摇 Absorption spectrum of neotame
由图 1 可以看出,纽甜在波长 218 nm 处有最大
吸收,由于在最大吸收波长条件下检测干扰少, 灵敏
度高,因此本研究选择 218 nm 作为检测波长.
2郾 1郾 2摇 流动相及洗脱条件的选择
参照文献[7,14 - 16], 本研究同时对比了甲醇
与 0郾 02 mol / L 乙酸铵、 乙腈-离子对缓冲液( 辛烷磺
酸钠)、乙腈与 0郾 02 mol / L 磷酸氢二铵 、乙腈与 0郾 02
mol / L 硫酸铵 4 种流动相体系, 结果表明乙腈与
0郾 02 mol / L磷酸氢二铵缓冲液体系的分离效果
最佳.
将乙腈与 0郾 02 mol / L 磷酸氢二铵在体积比分
别为 10颐 90,20颐 80,25颐 75 及 30颐 70 的条件下对纽甜
标准品进行等度洗脱 ( 检测波长 218 nm, 柱温 30
益),结果发现两者体积比为 10颐 90 及 20颐 80 时纽甜
30 min 内未出峰, 体积比在 25颐 75 时纽甜出峰时间
在 16 min 左右,但体积比为 30颐 70 时纽甜能在 7 min
内出峰 ,且峰形良好, 为提高检测效率, 本研究选择
乙腈与 0郾 02 mol / L 磷酸氢二铵体积比为 30颐 70.
2郾 1郾 3摇 柱温及色谱条件的确定
在 1郾 2 的条件下 , 本研究分别考察了 25,30,
35,40 益 4 个温度条件下纽甜的分离情况 . 结果发
现在此温度范围内柱温对纽甜色谱峰峰形及保留时
间的影响均不显著, 本研究选择柱温为 30 益 .
通过实验, 最终确定色谱条件: 流动相为乙腈与
0郾 02 mol / L 磷酸氢二铵 ( 体积比为 30颐 70),流速为 1
mL / min, 进样量 10 滋L, 柱温为 30 益,紫外检测器波
长 218 nm. 在此条件下, 纽甜标准物质的色谱图如
图 2,莱芜姜酒样品色谱图见图 3.
图 2摇 纽甜标准溶液色谱图
Fig. 2摇 Chromatogram of neotame standard solution
图 3摇 莱芜姜酒样品色谱图
Fig. 3摇 Chromatogram of Laiwu Ginger鄄liquor
87 食品科学技术学报摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2014 年 11 月