Page 88 - 《食品科学技术学报》2026年第1期
P. 88
ऐ ࿗ 食品科学技术学报জজজজজজজজজজজজজজজজ জ ԡᤃ 年 ϟ 月
ʢᣰ ቝᔽႿ 振荡培养 ࿗ ၤᖔ考察底物浓度ܦ接种量及发酵 以葡萄糖为对照绘制总糖检测的标准曲线 Џϟ࿗ ᤥ 山
温度等因素对多肽得率的影响ᤥ 发酵完成后灭菌ᖔ 茶籽饼粉及其发酵产物中多肽的含量检测参照文
发酵液 ࿗ቩ 离心弃除菌体及未消化的底物ᖔ上清液 献Џϟጢ ͱ ϟᤃ报道的方法进行ᤥ 首先ᖔ以四肽标准品
用 ԡ᥊ ࿗ጢ ဂቝ 微孔滤膜过滤后冷冻干燥即得发酵山茶 ᥈ᢃ᥋᥈ᢃ᥋ఋᢃʢ᥋ዶʢ੫ 进行山茶籽多肽的含量测定ᖔ取 ϟ᥊ ጢ
籽多肽ᖔͱ ԡ ቩ 下保存备用ᤥ ቝᓂ 不同含量的标准品溶液分别与 ϟቝᓂ 双缩脲试剂
ϓᤫ ᇺᤫ ই 山茶籽多肽 ጢᓂ 反应器发酵工艺优化 混合ᖔ室温下反应 ԡ ቝᔽႿ 后ᖔ在 ጢ࿗ԡ Ⴟቝ 处记录标准
ϟ᥊ ሕ᥊ ࿗᥊ ϟজ 单因素实验设计 品溶液的吸光度并绘制标准曲线ᤥ 在山茶籽饼粉发
在摇瓶发酵条件确定的基础上ᖔ利用 ጢᓂ 生物 酵产物的多肽含量检测中ᖔ取 ᥊ ጢ ቝᓂ 发酵上清液加
反应器进行实验室规模的初步放大并优化发酵工艺 入等体积质量分数为 ϟԡᠮ 的三氯乙酸 ྉఋऊዶɯ 水溶
参数ᤥ 固定底物浓度为 ᤃԡ 目粉碎的山茶籽饼粉 ሕԡ 液混匀并静置 ϟԡ ቝᔽႿᖔ然后 ऐ ԡԡԡ ʢ ᣰ ቝᔽႿ 室温下离心
੫ᣰ ᓂ 和蔗糖 ࿗੫ ᣰ ᓂᖔ在 ϟϟ ቩ 灭菌 ԡ ቝᔽႿ 后ᖔ接种优 ԡ ቝᔽႿ 脱除蛋白ᖔ离心上清液参照标准曲线测定的
化菌株种子液于 ሕጢ᥊ ጢ ቩ 条件下进行发酵ᖔ考察发酵 方法在 ጢ࿗ԡ Ⴟቝ 处进行多肽含量的测定ᤥ 山茶籽饼
转速ྉϟԡܦϟጢԡܦϟऐԡܦϟԡܦ࿗ԡ ʢ ᣰ ቝᔽႿɯܦ装液量ྉሕԡᠮ ܦ 粉发酵产物的多肽得率按式ྉϟɯ计算ᤥ
࿗ԡᠮܦጢԡᠮܦᤃԡᠮܦᎮԡᠮɯܦ通气量 ྉԡ᥊ ԡܦԡ᥊ ጢܦԡ᥊ ሕԡܦ ँ ᢉ Ⴌ ᣑ ቂ ġϟԡԡ᠐ ᤥ ྉ ϟ ɯ
ԡ᥊ ሕጢܦԡ᥊ ࿗ԡ ቝᖔ 即 ϟቝᔽႿ 通气量为发酵液体积的 式ྉϟɯ中ᖔँᖔ单位质量山茶籽饼粉发酵的多肽
得率ᖔ᠐ ଫᖔ发酵上清液多肽质量浓度ᖔቝ੫ ᣰ ቝᓂଫႬᖔ发
ԡ᥊ ԡܦԡ᥊ ጢܦ ԡ᥊ ሕԡܦ ԡ᥊ ሕጢܦ ԡ᥊ ࿗ԡ 倍 ɯ 和接种量 ྉᎮᠮ ܦ
ϟϟᠮ ܦϟጢᠮ ܦϟँᠮ ܦሕᠮ ɯ对山茶籽多肽得率的影响ᤥ 酵液体积ᖔቝᓂଫቂᖔ发酵中使用的山茶籽饼粉质量ᖔ
ϟ᥊ ሕ᥊ ࿗᥊ জ 正交试验设计 ቝ੫ᤥ
山茶籽多肽的 ጢᓂ 反应器发酵采用正交试验法 ϓᤫ ᇺᤫ ᣤই 山茶籽饼粉发酵前后分子质量分布测定
进行工艺参数优化ᖔ通过四因素三水平的正交试验 山茶籽饼粉发酵前后分子质量分布根据 ۼᑕႿ੫
考察发酵转速ྉዶɯܦ装液量ྉାɯܦ通气量ྉऊɯ 和接种 等 ЏϟᎮ 的方法采用 ۪̀ᓂऊ 法测定ᤥ 山茶籽饼粉及其
量ྉ᧕ɯ 对山茶籽多肽得率的影响ᖔ每个因素参考摇 发酵产物经ጢԡԡԡ ʢ ᣰ ቝᔽႿ 离心 ϟጢ ቝᔽႿᖔ取离心后的上
瓶发酵的结果选取高ܦ中ܦ低 ሕ 个水平ᖔ以获得山 清液进行分析ᖔ样品采用 ԡ᥊ ࿗ጢ ဂቝ 水系膜过滤后进
茶籽多 肽反应器发酵的 优化工艺参 数并进行 验 样ᤥ 色谱条件᧥采用 ఋ୩੫ᔀ ԡԡԡ ୩ۼᣮᓂྉሕԡԡ ቝቝ ġ
证ᤥ 山茶籽多肽 ጢᓂ 反应器发酵正交试验因素与 Ꭾ᥊ ऐቝቝᖔጢဂቝɯ色谱柱进行分离ᖔ柱温为 ࿗ԡ ቩ ᖔ流动
水平见表 ϟᤥ 对优化后发酵过程中 ᡱ̀ 值ܦ溶氧值 相为乙腈 ᣰ 水 ᣰ 三氟乙酸ྉ 体积比为 ࿗ጢᨒ ጢጢᨒ ԡ᥊ ϟɯᖔ紫
ྉ᧕ᨃɯ ܦ残糖和多肽含量等指标 每 隔 ၤ 进行一次 外检 测器检测波长为 ԡ Ⴟቝᖔ 流动相流速为 ԡ᥊ ጢ
监测ᖔ以获 得发酵过程中底物消耗及 产物生成 的 ቝᓂ ᣰ ቝᔽႿᖔ进样量为 ϟԡ ဂᓂᤥ
ϓᤫ ᇺᤫ ᎒ই 山茶籽蛋白及多肽的体外抗氧化活性测定
动力学变化ᤥ
山茶 籽多肽抗氧化活性测定以 谷 胱 甘 肽
表 ϟজ 山茶籽多肽 ጢᓂ 反应器发酵正交试验设计
ྉ᥈୩̀ɯ为阳性对照ᖔ通过体外 ᧕۪۪̀ 自由基ܦዶାఋ୩ շ
ఋᑕᤦ ϟজ ᨃʢᡷၤᆍ੫ᆍႿᑕ ᔀᡱᔀʢᔽቝᔀႿᡷ༁ ʛᔀ༁ᔽ੫Ⴟ ᆍʢ ࣷᐹቂᓣᤀᤀᔠᐹ ༁ᔀᔀʛ
自由基和羟基自由基清除实验进行评价 Џϟऐ ᤥ ᧕۪۪̀
ᡱᔀᡱᡷᔽʛᔀ ᔀʢቝᔀႿᡷᑕᡷᔽᆍႿ ᔽႿ ጢ ᓂ ᤦᔽᆍʢᔀᑕዹᡷᆍʢ
自由基清除实验᧥不同浓度的山茶籽蛋白及发酵多
因素
肽样品溶液与 ᧕۪۪̀ 溶液ྉԡ᥊ ϟ ቝቝᆍ ᣰ ᓂɯ 混合ᖔ室温
水平 ዶ 转速 ᣰ ା 装液量 ᣰ ऊ 通气量 ᣰ ᧕ 接种量 ᣰ
下避光反应 ሕԡ ቝᔽႿ 后ᖔ在 ጢϟᎮ Ⴟቝ 测量吸光度并计算
ͱϟ
ྉʢኼቝᔽႿ ɯ ᠮ ቝ ᠮ
շ
清除 率ᤥዶାఋ୩ 自由基清除实 验᧥Ꭾ ቝቝᆍ ᣰ ᓂ 的
ϟ ϟጢԡ ࿗ԡ ԡ᥊ ԡ ϟጢ
ዶାఋ୩ 溶液用无水乙醇稀释至 Ꭾሕ࿗ Ⴟቝ 处吸光度为
շ
ϟऐԡ ጢԡ ԡ᥊ ጢ ϟँ
ԡ᥊ Ꭾԡ ō ԡ᥊ ԡᖔ与不同含量样品溶液避光反应 ᤃቝᔽႿ
ሕ ϟԡ ᤃԡ ԡ᥊ ሕԡ ሕ
后在 Ꭾሕ࿗ Ⴟቝ 测量吸光度并计算清除率ᤥ 羟自由基
ϓᤫ ᇺᤫ ጇই 山茶籽饼粉及其发酵产物成分含量测定 清除实验᧥将等浓度ྉሕ ቝቝᆍ ᣰ ᓂɯ 的 èᔀ୩ᨃ 溶液和水
࿗
山茶籽饼粉及其发酵产物的总蛋白含量采用 杨酸乙醇溶液加入不同含量的样品溶液中混匀ᖔ然
ାʢᑕʛᆍʢʛ 方法测定ᖔ使用牛血清白蛋白绘 制蛋白含 后加入等体积的 ̀ ᨃ ྉሕ ቝቝᆍ ᣰ ᓂɯ溶液于 ሕᎮ ቩ 反应
量检测的曲线 Џϟሕ ᤥ 总糖含量采用苯酚硫酸法测定ᖔ ሕԡ ቝᔽႿᖔ在 ጢϟԡ Ⴟቝ 处测定吸光度并计算自由基清除
