Page 87 - 《食品科学技术学报》2026年第1期

第 ࿗࿗ 卷第 ϟ 期জজজজজ 黄情茹等᧥ 山茶籽多肽的发酵制备及其抗氧化和透明质酸酶抑制活性 ऐ ሕ

因反应条件温和ܦ可控ᖔ且肽键断裂位置明确ᖔ而具 海ɯ有限公司ଫ᥈ᓂ ͱ԰ϟᥘ 型高速冷冻离心机ᖔ上海卢
有易规模化ܦ可预见性强等优点ᖔ是制备活性肽的有 湘仪离心机仪器有限公司ଫɟᣮ͐ ͱ ᓂ୩ ͱጢԡ୩ϟϟ 型立式
效方法 Џऐ ͱ ँ૒ ᤥ 和酶解法相比ᖔ微生物发酵制备植物 压力蒸汽灭菌器ᖔ上海博讯实业有限公司医疗设备
蛋白多肽避免了使用昂贵的蛋白酶而具 有成本优 厂ଫା᤟ࣼᔀ ᡱᑕʢʛ 培养箱ܦఋ̀Ի ͱϟԡԡା 型恒温培养摇床ᖔ
势ᖔ且发酵过程中产生的多肽种类和数量更具多样 上海一恒科学仪器有限公司ଫ୩ۼ ͱ ऊȮ ͱ ԰è 型超净
性 Џऐ ͱ ँ૒ ᤥ 传统发酵食品中存在的乳酸菌ܦ芽孢杆菌 台ᖔ苏州安泰空气技术有限公司ଫఋ᪲Ȯ ͱ ᧧Ⴟᡷᔀ᤟᤟ᔽèᔀʢቝዶ ᣰ
等细菌以及酵母ܦ曲霉等真菌是发酵制备植物多肽 ᡷᢃᡱᔀ ዶ 型台式玻璃发酵罐ᖔ迪必尔生物工程ྉ 上海ɯ
中常用的微生物菌种 Џँ ͱ ϟԡ૒ ᤥ 有限公司ଫዶጢϟϟϟँᤃԡԡ 型酶标仪ᖔ美国赛默飞世尔科
山茶籽多肽在功能性食品和医药产品中具有较 技公司ଫዶ੫ᔽ᤟ᔀႿᡷ ϟϟԡԡ 型高效液相色谱仪ᖔ美国安捷
高的开发价值 Џ࿗ ͱ ጢᖔϟϟͱ ϟ԰૒ ᤥ 多肽的规模化生产是制 伦科技有限公司ᤥ
约其应用的主要因素ᖔ通过生物反应器发酵实现规 ϓᤫ ᇺই 实验方法
ϓᤫ ᇺᤫ ϓই 山茶籽饼原料预处理
模化制备多肽是活性多肽可持续生产的重要途径ᤥ
现有山茶籽发酵多肽研究多停留在实验 室小试阶 参照文献Џϟ૒ᖔ发酵之前采用有机溶剂对山茶
段ᖔ发酵放大工艺优化与多维度活性评价方面的研 籽饼原料进行脱脂ᤥ 将山茶籽饼经粉碎处理并过
究不足ᤥ 为拓展山茶籽蛋白的高值化利用ᖔ本研究 ᤃԡ 目筛ᖔ过筛的山茶籽饼粉加入正己烷ྉጢ ቝᓂ ᣰ ੫ɯ 室
以抗氧化活性为指标ᖔ评估不同菌种发酵山茶籽多 温浸泡 ᤃၤᖔ过滤后的残渣用体积分数 ँԡᠮ 的乙醇
肽的抗氧化能力并对发酵菌种进行筛选ᤥ 在此基础 在室温超声辅助提取 ሕԡ ቝᔽႿᖔ以去除皂苷和类黄酮
之上ᖔ通过 ጢᓂ 生物反应器对山茶籽多肽的实验室 等小分子ᖔ再次过滤后残渣置通风处晾干ᖔ所得脱脂
规模发酵放大进行参数优化ᖔ旨在为山茶籽来源生 山茶籽饼粉密封后 ࿗ቩ 保存备用ᤥ
物活性肽的工业化发酵生产及其在功能性食品等领 ϓᤫ ᇺᤫ ԣই 发酵菌种活化及山茶籽多肽的发酵菌种筛选
菌种活化及孢子液制备᧥植物乳杆菌用 ᥘ኏୩ 肉
域的应用提供技术参考ᤥ
汤培养基于 ሕᎮ ቩ 培养 ࿗ऐ ၤᖔ活化后转接培养至对数
ϓই 材料与方法 生长期ᖔ制成 ϟġ ϟԡ ऊèВ ᣰ ቝᓂ 的种子菌悬液ᖔ备用ᤥ
ऐ
米曲霉ܦ毛霉接种至 ۪᧕ዶ 平板上于 ԰ऐ ቩ 培养 ࿗ጲ ᤃ
ϓᤫ ϓই 材料与试剂 ʛ 活化ᖔ使用无菌水冲洗收集孢子于锥形瓶中ᖔ调节
山茶籽饼ᖔ心族 ྉ 上海ɯ 农业科技有限公司ଫ枯 孢子浓度至 ϟġ ϟԡ ऊèВ ᣰ ቝᓂ 备用ᤥ 枯草芽孢杆菌
ऐ
草芽孢杆菌ྉଧᐹዞᔠᤀᤀࣩ໧ ໧ࣩᤇᡙᔠᤀᔠ໧ɯϟྉ શᨃ঎ ԰ँϟጢ࿗ɯܦ枯草芽 活化后接种至 ᓂା 培养基于 ሕᎮ ቩ 培养 ԰࿗ ၤᖔ调节菌
孢杆菌 ԰ྉ શᨃ঎ ԰ँϟጢጢɯᖔ分离自酸面团ᖔ保藏于中国 液浓度至 ϟġ ϟԡ ऊèВ ᣰ ቝᓂ 备用ᤥ
ऐ
微生物保藏中心ྉऊ᥈ᥘऊऊɯᤥ 植物乳杆菌ྉ ᒦᐹዞᡙᔠᡓᤀᐹ᤬ 山茶籽饼粉的摇瓶发酵及菌种筛选᧥称取 ԡ᥊ ऐ ੫
Ⴅᡙᔠᤇᐹዞᔠᤀᤀࣩ໧ ᡓᤀᐹႥᡙᐹʗࣩቂɯᖔ 分离自纳豆发酵物ଫ 米曲霉 蔗糖和 Ꭾ੫ 山茶籽饼粉充分混匀ᖔ装入 ጢԡԡ ቝᓂ 锥形
ྉዛ໧ᡓᓣʗ੖ᔠᤀᤀࣩ໧ ᅳʗᡥऊᐹᓣɯᖔ 分 离自酱油发酵残渣ଫ 毛霉 ϟ 瓶中并加入 ԰ԡԡ ቝᓂ 蒸馏水ᖔ于 ϟ԰ϟ ቩ 灭菌 ԰ԡ ቝᔽႿᤥ
ྉࣩ᤹ዞᅳʗ ʗᅳࣩଝᔠᐹႥࣩ໧ɯᖔ分离自发酵腐乳ଫ毛霉 ԰ྉ ࣩ᤹ዞᅳʗ 待培养基冷却后将活化好的菌悬液或孢子悬液按
ʗᐹዞᓣቂᅳ໧ࣩ໧ɯᖔ分离自发酵豆豉ᖔ均由本实验室保 藏ᤥ ϟጢᠮ 体积比接种至培养基中ᖔ混合均匀后置于摇床
ᥘ኏୩ 培养基ܦ۪᧕ዶ 培养基ᖔ青岛海博生物ଫᓂା 固体 以 ϟऐԡ ʢ ᣰ ቝᔽႿ 进行振荡培养发酵 ԰࿗ ၤᖔ细菌ྉ 植物乳
培养基ܦᓂା 液体培养基ᖔ北京索莱宝科技有限公司ଫ 杆菌ܦ芽孢杆菌ɯ 培养温度为 ሕᎮ ቩ ᖔ真菌ྉ 米曲霉ܦ
消泡剂ᖔ 上海迈瑞 尔生化科技 有限公司ଫ᥈᤟ᢃ᥋᥈᤟ᢃ᥋ 毛霉ɯ培养温度为 ԰ऐ ቩ ᖔ发酵后离心取上清液ᖔ采用
ఋᢃʢ᥋ዶʢ੫ 四肽标准品 ྉँऐ᥊ ԡԡᠮ ɯᖔ美国 ୩ᔽ੫ቝᑕ᥋ዶ᤟ʛʢᔽዹၤ 体外抗氧化活性评价方法评估不同菌种发酵山茶籽
公司ଫ԰ᖔ԰ࣕ᥋联氮基᥋双 ྉሕ᥋乙基苯并噻唑啉᥋ᤃ᥋磺酸ɯ 多肽的抗氧化活性ᖔ筛选抗氧化能力最强的菌株进
二铵 盐 ྉዶାఋ୩ɯܦ ϟᖔ ϟ᥋二苯基᥋԰᥋三硝基苯肼 ྉ᧕۪᥋ 行后续研究ᤥ
۪̀ɯᖔ阿拉丁试剂有限公司 ྉ 中国上海ɯଫ其他试剂 ϓᤫ ᇺᤫ ᇺই 基于筛选菌株的山茶籽饼粉摇瓶发酵优化

均为分析纯ᤥ 在 ϓᤫ ᇺᤫ ԣ 节的基础上ᖔ采用筛选出的菌株进行
ϓᤫ ԣই 仪器与设备 摇瓶发酵制备山茶籽多肽ᤥ 将筛选的微生物培养种
ᥘጶϟԡ࿗ጶ 型分析天平ᖔ梅特勒ͱ 托力多仪器ྉ 上 子液以 一定比例接 种至无菌发 酵培养基ᖔ 以 ϟऐԡ