Page 83 - 《食品科学技术学报》2026年第1期
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第 ࿗࿗ 卷第 ϟ 期জজজ জ জজ 鲁晶晶等᧥ 基于 ୩ఋऊ᥋ϟ 细胞味觉感知模型的西瓜豆酱鲜味肽的呈味特性分析 Ꭾ ँ
জজ 力为 ϟԡԡ᥊ ԡᠮ ō ँ᥊ ሕᠮ ᖔሕ 种鲜味肽处理组的 ୩ఋऊ᥋ϟ
细胞活力与空白对照组相比均无显著统计学差异
ྉۗ ᢦԡ᥊ ԡጢɯᖔ证明在 ϟ᥊ ԡ ቝቝᆍ ᣰ ᓂ 浓度下孵育 ऐၤᖔሕ
种鲜味肽对 ୩ఋऊ᥋ϟ 细胞均无显著毒性作用ᖔ该孵育
时长适合后续实验ᤥ 将生长状态良好的 ୩ఋऊ᥋ϟ 细胞
使用浓度为 ϟ᥊ ԡ ቝቝᆍ ᣰ ᓂ 的 ሕ 种鲜味肽溶液进行孵
育ᖔ孵育时长 ऐၤᖔ提取 ୩ఋऊ᥋ϟ 细胞内总 શዶᖔ对提取
的总 શዶ 进行浓度ྉ ዛ ɯ 和纯度ྉ ዛ ɯ 检测ᖔ所有
ᤃԡ ऐԡ
样品的 ዛ ᣰ ዛ 及 ዛ ᣰ ዛ 比值均在可接受范围内ᖔ
ᤃԡ ऐԡ ᤃԡ ሕԡ
表明提取总 શዶ 质量较好ᖔ可用于后续实验ᖔ提取
结果见表 ሕᤥ
对 提 取出的 શዶ 进行反转 录ᖔ 反转录为
图 ᤃজ 孵育 ऐၤ 后 ୩ఋऊ᥋ϟ 细胞活力
ዹ᧕શዶᖔ进行实时荧光定量 ۪ऊྉीࣼᑕႿᡷᔽᡷᑕᡷᔽᔀ ʢᔀᑕ᥋ᡷᔽቝᔀ
èᔽ੫ ᤃজ ୩ఋऊ᥋ϟ ዹᔀ ᔽᑕᤦᔽᔽᡷᢃ ᑕᡷᔀʢ ᔽႿዹࣼᤦᑕᡷᔽᆍႿ ᆍʢ ऐ ၤ
۪ऊɯᤥ
表 ሕজ ሕ 种鲜味肽在 ୩ఋऊ᥋ϟ 细胞中孵育 ऐၤ 后总 શዶ 提取结果
ఋᑕᤦ ሕজ ᔀ༁ࣼᡷ༁ ᆍ ᡷᆍᡷᑕ શዶ ᔀᡷʢᑕዹᡷᔽᆍႿ ᆍ ᡷၤʢᔀᔀ ᡷᢃᡱᔀ༁ ᆍ ࣼቝᑕቝᔽ ᡱᔀᡱᡷᔽʛᔀ༁ ᑕᡷᔀʢ ᔽႿዹࣼᤦᑕᡷᔽᆍႿ ᔽႿ ୩ఋऊ᥋ϟ ዹᔀ༁ ᆍʢ ऐ ၤ
名称 ྉ 核酸ɯᣰ ྉ Ⴟ੫ኼဂᓂ ͱϟ ɯ ዛ ᤃԡ ዛ ऐԡ ዛ ᤃԡ ᣰ ዛ ऐԡ ዛ ᤃԡ ᣰ ዛ ሕԡ 样品类型 因子
ऊᆍႿᡷʢᆍ ऐԡᎮ᥊ ԡ᥊ ϟᎮँ ϟԡ᥊ ԡᎮጢ ᥊ ԡԡ ᥊ ϟ શዶ ࿗ԡ᥊ ԡԡ
ዶጶè᧕ ϟ ሕԡ࿗᥊ ጢ ሕ᥊ ᤃϟሕ ϟᤃ᥊ ጢԡ ᥊ ԡϟ ᥊ ϟᎮ શዶ ࿗ԡ᥊ ԡԡ
ᓂዶጶᓂ ϟ ँऐᎮ᥊ ࿗ँ᥊ ᤃऐԡ ࿗᥊ ऐሕ ᥊ ԡԡ ᥊ ԡᎮ શዶ ࿗ԡ᥊ ԡԡ
ᓂఋèጶ ϟ ᤃऐ᥊ ऐ ሕϟ᥊ Ꭾԡ ϟጢ᥊ ऐᤃϟ ᥊ ԡԡ ᥊ ԡᎮ શዶ ࿗ԡ᥊ ԡԡ
জজ 实时荧光定量 ۪ऊᖔ简称 ी۪ऊᖔ是一种分子生
物学技术ᖔ 用于通过聚合 酶 链 反 应 ྉ۪ऊɯ 对特定
᧕શዶ 或 શዶ 模板进行定量分析ᤥ 而 ୩ɟା ᥈ʢᔀᔀႿ ᧧
是一种 ᧕શዶ 结合染料ᖔ它能够与双链 ᧕શዶ 结合并
发出荧光ᤥ 荧光强度与双链 ᧕શዶ 的量成正比ᖔ其特
点是操作简便ᖔ成本相对较低 Џϟ ᖔ因此本实验选用
该染料进行实时荧光定量 ۪ऊ 实验ᤥ 已有文献证
明味觉感受可以激活 ୩ఋऊ᥋ϟ 细胞ᖔ并使响应味觉受
体被激活ᖔቝશዶ 表达量上调 Џᤃ ᤥ 因此本研究通过
实时荧光定量 ۪ऊ 实验验证 ሕ 种鲜味肽能否对于
样品组与 ऊᆍႿᡷʢᆍ 组比 较ᖔ᥍᥍ 表示有极显著性差异 ྉ ۗ ጐ ԡ᥊ ԡϟɯᖔ
主要鲜味受体即 ఋϟϟ 和 ఋϟሕ 起到激活效果ᤥ 实
᥍᥍᥍表示有极其显著性差异ྉ ۗ ጐԡ᥊ ԡԡϟɯ ᤥ
时荧光定量 ۪ऊ 计算结果见图 Ꭾᤥ 图 Ꭾজ ሕ 种鲜味肽对 ୩ఋऊ᥋ϟ 细胞鲜味受体 ఋϟϟ 和
由图 Ꭾ 可知ᖔ相较于 ऊᆍႿᡷʢᆍ 组ᖔ除 ᓂఋèጶ 对 ఋϟሕ ቝશዶ 表达量的影响
ఋϟሕ 受体没有显著作用以外ᖔ其他两个鲜味肽对于 èᔽ੫ Ꭾ জ ጶᔀዹᡷ༁ ᆍ ᡷၤʢᔀᔀ ᡷᢃᡱᔀ༁ ᆍ ࣼቝᑕቝᔽ ᡱᔀᡱᡷᔽʛᔀ༁ ᆍႿ ቝશዶ
两种鲜味受体以及 ᓂఋèጶ 对于 ఋϟϟ 受体都具有 ᔀᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ᔀᔀ༁ ᆍ ࣼቝᑕቝᔽ ʢᔀዹᔀᡱᡷᆍʢ༁ ఋϟϟ ᑕႿʛ ఋϟሕ
显著作用效果ᖔ使相应受体的 ቝશዶ 表达量显著上 ᔽႿ ୩ఋऊ᥋ϟ ዹᔀ༁
জ
升ᖔ证明这 ሕ 种鲜味肽都可以促进鲜味受体 ఋϟϟ 表达量影响极大ᖔ这与分子对接结果一致ᖔዶጶè᧕
和 ఋϟሕ ቝશዶ 的表达ᤥ 与 ఋϟϟ ᣰ ఋϟሕ 受体的分子模拟对接实验中对接能
ሕ 种鲜味肽中ᖔዶጶè᧕ 对于两种鲜味受体即 最小ᖔ即肽段 ዶጶè᧕ 与 ఋϟϟ ᣰ ఋϟሕ 受体结合最
ఋϟϟ 和 ఋϟሕ 都 具 有极显著作用效果 ྉ ۗ 值 ጐ 为紧密ᤥᓂዶጶᓂ 在分子对接中对接能中等的肽段ᖔ
ԡ᥊ ԡԡϟɯᖔ说明 ዶጶè᧕ 刺激后对于鲜味受体 ቝશዶ 在本实验中ᖔᓂዶጶᓂ 对于两种鲜味受体的 ቝશዶ 也

