Page 173 - 《食品科学技术学报》2026年第1期
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第 ࿗࿗ 卷第 ϟ 期জজজজজজ 王秀琪等᧥ 发芽处理对粳米和糯米理化特性与结构特征的影响及调控机制 ϟ ᤃ ँ
ϓᤫ ᇺᤫ ই 糙米中灰分含量的测定 谱仪在 ԡԡԡ ጲ ࿗ԡԡ ዹቝ ͱϟ 扫描 ϟԡ 次ᖔ每个像素的曝
参考 ᥈ା ጢԡԡँ᥊ ࿗ᗵԡϟᤃβ食品安全国家标准 食 光时间均为 ԡ᥊ ԡϟ ༁ᤥ 所有样 品的半高宽 èۼ̀̀ 值
品中灰分的测定ଭ测定样品中的灰分含量ᤥ 根据 ԻၤᑕႿ੫ 等 Џϟጢ 的方法计算ᤥ
ϓᤫ ᇺᤫ ጇই 糙米中还原糖含量的测定 ϓᤫ ᇺᤫ ࣮ই 糙米结晶性质的测定
参照张广琛等 Џϟሕ 的方法进行样品还原糖含量 在测定之前ᖔ需将全部样品置于饱和氯化钠干
的测定ᤥ 准确称取 ԡ᥊ ጢ ੫ 样品与 ࿗᥊ ጢ ቝᓂ 水混合ᖔ涡 燥器内保存 Ꭾʛᖔ让样品的含水量达到恒定ᤥ 在检测
旋振荡 ሕԡ ቝᔽႿᖔ࿗ ϟሕԡ ʢ ᣰ ቝᔽႿ 离心 ሕԡ ቝᔽႿᖔ弃沉淀ᖔ取 ሕ ྉ࿗ԡ Ҵܦ࿗ԡ ቝዶɯ过程中ᖔ以 ϟԡ ᣰ ቝᔽႿ 的扫描速率对样
ቝᓂ 上清液与 Ꭾቝᓂ 水混合稀释ᤥ 将 ቝᓂ 该稀释液 品进行扫描ᤥ 扫描的衍射角ྉɆɯ从 ϟԡ延伸至 ँԡᖔ
转移至 ጢ ቝᓂ 试管中ᖔ并与 ቝᓂ 水和 ϟ᥊ ጢ ቝᓂ ᧕શ୩ 扫描步长精确设置为 ԡ᥊ ԡሕሕᤥ 完成扫描后ᖔ 按照
试剂混合加热 ጢቝᔽႿᤥ 以水为对照ᖔ在 ጢ࿗ԡ Ⴟቝ 处测 ᥘᑕʢᡷᔀႿ༁ 等 Џϟᤃ 的方法ᖔ对样品的相对结晶度ྉऊɯ 进
吸光度ᤥ 行计算ᤥ
ϓᤫ ᇺᤫ ᣤই 糙米中 ም᥋淀粉酶活性测定 ϓᤫ ᇺᤫ ϓԔই 糙米热力学性质的测定
用 ም᥋淀粉酶活性检测试剂盒检测样品中 ም᥋淀
将所有糙米与蒸馏水按照料液比ྉቝ੫ ᣰ ቝᓂɯϟᨒ ሕ
粉酶的活性ᤥ 将 ԡ᥊ ϟ ੫ 样品与蒸馏水混合ᖔ孵育 ϟጢ 在液体坩埚中混合ᖔ立即密封ᖔ以 ϟԡ ቩ ᣰ ቝᔽႿ 的速率
ቝᔽႿ 后在 ጢ ቩ ܦ࿗ ጢԡ ʢ ᣰ ቝᔽႿ 的条件下离心 ϟԡ ቝᔽႿᖔ收 使温度从 ሕԡ ቩ 提高至 ϟԡ ቩ ᖔ以空坩埚为参比ᤥ 记
集上清液并稀释至 ϟԡ ቝᓂᖔ即得样品溶液ᤥ 按照说 录起始温度ܦ峰值温度ܦ结束温度以及糊化焓ᤥ
明 依 次加入试剂盒中的试剂ᖔ 随后将混合液于 ϓᤫ ᇺᤫ ϓϓই 糙米糊化黏度特性的测定
ϟԡԡ ቩ 加热 ϟԡ ቝᔽႿᤥ 在 ጢ࿗ԡ Ⴟቝ 处测量并记录吸光 糙米的糊化特性采用 ዶ 进行评估ᤥ 测定糙
度ᖔ根据试剂盒说明书进行标准曲线的绘制和 ም᥋淀 米的水分含量后ᖔ称取 ሕ੫ 糙米ᖔ根据水分含量计算
粉酶活性的计算ᤥ
并加入适量蒸馏水ᖔ置于 ዶ 样品罐中充分混合ᤥ
ϓᤫ ᇺᤫ ᎒ই 糙米中 ᧣ዛ᤹ɔϟ 基因相对表达量的测定 设定运行程序为 ጢԡ ቩ 保温 ϟቝᔽႿᖔ在 ࿗ቝᔽႿ 时升温到
使用植物 શዶ 提取试剂盒完成糙米中 શዶ 的
ँጢ ቩ ᖔ在 ँጢ ቩ 保温 ϟ᥊ ጢ ቝᔽႿᖔ在 ϟϟ ቝᔽႿ 时降温到 ጢԡ
提取ᤥ 使用带有 ੫᧕શዶ 清除剂的 ఋʢᑕႿ༁୩ዹʢᔽᡱᡷ ۪ʢᔽቝᔀ᥋
ቩᖔ最后在 ጢԡ ቩ 保温 ቝᔽႿᤥ
୩ዹʢᔽᡱᡷఋᥘ 快速反转录试剂盒将 શዶ 逆转录合 成
ϓᤫ ই 数据处理
ዹ᧕શዶᤥ 将 ዹ᧕શዶ 与 ୩ɟା ۪ʢᔀቝᔽ ጶ ఋᑕी ֒ ጢᎮ 混
每组实验均开展 ሕ 次重复测试ᖔ结果以平均值 ō
合ᖔ上机进行 ीఋ ͱ۪ऊ 分析ᤥ 程序设置为 ँጢ ቩ 温
标准差表示ᤥ 数据采用 ୩۪୩୩Ꭾܦᨃʢᔽ੫ᔽႿ ԡጢ 和 ఋᔀऔ
度下预变性 ሕԡ ༁ᖔ随后进行 ࿗ԡ 个循环的扩增程序ᖔ
软件进行处理ᤥ
每个循环包含 ँጢ ቩ 下 ጢ༁ 和 ᤃԡ ቩ 下 ϟԡ ༁ᤥ ᧣ዛ᤹ɔϟ
基因ྉ前向序列 ఋऊఋఋ᥈ఋऊऊऊఋఋఋऊ᥈᥈ఋऊऊఋऊଫ反向序 ԣই 结果与分析
列 ዶऊఋఋዶ᥈ዶऊ᥈ऊ᥈ఋऊऊዶ᥈ዶఋऊ᥈ɯ 的定量引物是用
۪ʢᔽቝᔀʢ ۪ʢᔀቝᔽᔀʢ ጢ᥊ ԡ 软件设计的ᖔ设置 ᧣ዛዞᡙᔠႥϟ 基因 ԣᤫ ϓই 不同发芽阶段糙米中淀粉ܓ灰分和水分含量的
ྉ前向 序 列 ᥈ዶዶऊఋ᥈᥈ఋዶఋ᥈᥈ఋऊዶዶ᥈᥈ऊఋ᥈ଫ 反向序 分析
列 ዶऊዶऊ᥈᥈ዶ᥈ऊఋऊ᥈ఋఋ᥈ఋዶ᥈ዶዶ᥈ ɯ 为内 参ᖔ 采用 为比较不同发芽阶段糯米和粳米的组分差异ᖔ
ͱ᪵᪵ࣷ௴ 对 ሕ 个发芽阶段的 ࿗ 组样品进行了检测ᖔ结果见表
法计算目标基因的相对表达量ᤥ
ϓᤫ ᇺᤫ ࣽই 糙米短程有序分子结构的测定 ϟᤥ 如表 ϟ 所示ᖔ稻花香的直链淀粉含量随着发芽时
参照张丽娟等 Џϟ࿗ 的研究方法ᖔ将糙米与溴化钾 间的延长呈现下降趋 势ᖔ 从未发芽糙米的 ϟϟ᥊ ጢ
充分混合磨粉后压成圆状薄片ᤥ 在 ࿗ ԡԡԡ ጲ ࿗ԡԡ ੫ ᣰ ϟԡԡ ੫ 降至发芽 ࿗ऐ ၤ 时的 ϟԡ᥊ ሕ ੫ ᣰ ϟԡԡ ੫ᤥ 由于糯
ͱϟ ͱϟ 米ྉ松粘一号和中宝佳糯ɯ 直链淀粉含量较低ᖔ未检
ዹቝ ܦ࿗ ዹቝ 分辨率条件下ᖔ以空气作为背景记录光
ͱϟ ͱϟ 测到其直链淀粉的含量ᤥ 所有样品中ᖔ未发芽糙米
谱ᤥ 由于 ϟ ԡ࿗Ꭾ ዹቝ 和 ϟ ԡ ዹቝ 处的峰强度分别
反映了糙米淀粉的有序及无定形区域ᖔ故可用 ϟԡ࿗Ꭾ 中支链淀 粉 含量最高ᖔ且糯米比粳米至少高 ϟԡ᥊ ࿗
ͱϟ ͱϟ ɯ 来表 ੫ ᣰ ϟԡԡ ੫ᤥ 糯米因其 ۩ଝ 基因天然突变ᖔ导致合成直
ዹቝ 和 ϟԡ ዹቝ 处峰的强度之比ྉ ቴ
ϟ ԡ࿗Ꭾ ᣰ ϟ ԡ
征糙米的短程有序分子结构ᤥ 链淀粉的关键酶失活ᖔ从而使支链淀粉成为淀粉组
取 ԡ᥊ ϟ ੫ 样品置于载玻片上ᖔ然后使用拉曼光 成的绝对主体 ЏϟᎮ ᖔ因而糯米中支链淀粉含量高于粳
