Page 134 - 《食品科学技术学报》2026年第1期
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ϟ ሕ ԡ 食品科学技术学报জজজজজজজজজজজজজজজজ জ ԡᤃ 年 ϟ 月
换培养基并记录果蝇的死亡数ᖔ直至所有果蝇死亡 ϟ᥊ ࿗᥊ ࿗᥊ ጢজ 果蝇脑部氧化应激相关指标的测定
后结束实验ᖔ绘制生存曲线并统计各组最大寿命ܦ中 果蝇饲养参照 ϓᤫ ᤫ ᤫ ϓ 寿命实验方法ᖔ每组 Ꭾ
位寿命ܦ平均寿命及其延长率ᤥ 按照式ྉɯ 计算平 管ᖔ每管 ሕԡ 只ᤥ 饲养一定天数后ᖔ先将果蝇饥饿
均寿命延长率ᤥ ၤᖔ后用氮气吹晕ᖔ在冰面上用镊子快速摘取果蝇头
௴ ͱ ௴ 部ᖔ用分析天平称量质量ᤥ 将果蝇头部立即转移至
平均寿命延长率 ᢉ ԡ ϟ ġϟԡԡ᠐ ᤥ ྉ ɯ
௴ 无酶的 ቝᓂ 离心管中ᤥ 按照果蝇质量ྉቝ੫ɯ 与生理
ϟ
式ྉɯ中ᖔ௴ 为实验组平均寿命ᖔʛଫ௴ 为对照 盐水体积ྉቝᓂɯ 为 ϟᨒ ँ的比例在冰上用手持研磨仪
ԡ ϟ
组平均寿命ᖔʛᤥ 将果蝇头部彻底研磨均匀ᖔ࿗ ԡԡԡ ʢ ᣰ ቝᔽႿ 离心 ϟԡ ቝᔽႿᖔ
ϟ᥊ ࿗᥊ ࿗᥊ জ 果蝇攀爬能力检测 除去沉淀ᖔ 稀释上清液ᤥ 根据 ାऊዶ ྉ ᤦᔽዹᔽႿዹၤᆍႿᔽႿᔽዹ
研究表明ᖔዶ᧕ 果蝇的突触传递功能和攀爬行 ᑕዹᔽʛɯ试剂盒说明书ܦ୩ᨃ᧕ 试剂盒说明书ܦऊዶఋ 试剂
为会随着日龄增加出现退化现象ᤥ 参照 ɟᑕႿ੫ 等 Џϟጢ 盒说明书和 ᥘ᧕ዶ 试剂盒说明书测定蛋白浓度ܦ୩ᨃ᧕
的方法ᖔ收集 ࿗ ၤ 内羽化的野生型雌蝇以及 ዶ᧕ 果 和 ऊዶఋ 的活性以及 ᥘ᧕ዶ 含量ᤥ
蝇雌蝇ᖔ实验组均为 ϟԡ 只ᖔሕԡ 只一管ᖔ饲养一定天 ϟ᥊ ࿗᥊ ࿗᥊ ᤃজ 果蝇脑部 ዶᏇ 水平ܦ乙酰胆碱酯酶活性
࿗
数ᤥ 将待测果蝇转移至距管底 ϟԡ ዹቝ 处标记好的玻 以及环磷酸腺苷含量的测定
璃管中ᖔ适应 ϟԡ ቝᔽႿᖔ轻晃玻璃管使其跌至管底ᖔ由 果蝇饲养参照 ϓᤫ ᤫ ᤫ ϓ 寿命实验方法ᖔ饲养结
于生理习性果蝇将会沿着管壁向上爬ᖔ记录 ϟጢ ༁ 内 束后ᖔ每组各随机取出 ሕԡ 只果蝇ᖔ饥饿 ၤ 后氮气
爬到 ऐዹቝ 处的果蝇数量ᤥ 连续记录 ሕ 次ᖔ每次间隔 麻醉ᖔ倒至有磷酸盐缓冲液ྉ۪ା୩ɯ 的器皿中ᖔ在冰面
ጢቝᔽႿᖔ以爬过 ϟԡ ዹቝ 标记的果蝇数量在总数中的比 上用镊子快速摘取果蝇头部ᖔ立即转移至装有 ጢԡԡ
例来表示果蝇的攀爬能力ᤥ ဂᓂ 预冷 ۪ା୩ 溶液的无 શዶ 酶的 ቝᓂ 离心管 中ᤥ
ϟ᥊ ࿗᥊ ࿗᥊ ሕজ 果蝇摄食量测定 在冰浴条件下ᖔ用手持研磨仪将其彻底研磨均匀ᖔ࿗
在摄食量测量方面ᖔ染料法是一种常用的方法ᖔ ቩܦϟ ԡԡԡ ʢ ᣰ ቝᔽႿ 离心 ቝᔽႿᖔ小心收集上清液ᤥ 按照
这种方法可以反映果蝇在自然状态下以及在一定时 ጶᓂ᧧୩ዶ 试剂盒的操作步骤ᖔ将制备好的组织匀浆液
间内固体食物的进食量ᖔ对于研究果蝇的摄食行为 用于 检测脑组织中 ዶᏇ 水平ܦ 乙酰胆碱酯酶
࿗
和营养状况具有重要意义ᤥ 果蝇饲养参照 ϓᤫ ᤫ ᤫ ϓ ྉዶዹၤጶɯ活性和环磷酸腺苷ྉዹዶᥘ۪ɯ的含量ᤥ
寿命实验方法ᖔ每组 ጢ 管ᖔ每管 ሕԡ 只ᖔ饲养一定天数 ϓᤫ ᤫ ጇই ఋ ۪ͦऊ 实验
后ᖔ每组随机选取 ሕԡ 只果蝇ᖔ分成 ሕ 管ᖔ每管 ϟԡ 只ᤥ 果蝇饲养方法参照 ϓᤫ ᤫ ᤫ ϓ 寿命实验方法ᖔ
摄食量测定参照 ᓂᔽ 等 Џϟᤃ 的方法ᖔ将所有果蝇转移 每组 ϟԡ 管ᖔ每管 ሕԡ 只ᤥ 饲养一定天数后ᖔ每组随
至空瓶中饥饿 ϟऐ ၤᖔ再喂饲含质量分数为 ᠮ 的溴 机取出 ϟጢԡ 只果蝇ᖔ用氮气吹晕后ᖔ在冰上用镊子
酚蓝ྉϟᠮ 琼脂ܦᠮ 溴酚蓝ܦጢᠮ 蔗糖ɯ 的饲料 ࿗ၤᤥ 快速摘取头部ᖔ提前准备好无菌无酶的 ጶ۪ 管和枪
将果蝇用氮气吹晕后ᖔ在光学显微镜下观察每只果 头以及高 温灭菌后的研钵ᖔ研 钵 使 用 前要用氮气
蝇的腹部颜色并进行评分ᤥ 使用从 ԡጲ ሕ 的主观评 预冷ᤥ 提取果蝇头部 ቝશዶᖔ按照试剂盒说明书进
分量表 ྉ 腹部无色到完全蓝色ɯ 测定食物摄 入 量ᤥ 行操作ᤥ
实验重复 ሕ 次ᤥ 根据反转录试剂盒 的说明书对 ቝશዶ 进行反
ϟ᥊ ࿗᥊ ࿗᥊ ࿗জ 果蝇肠道通透性测定 转录ᤥ 将反转录得到的 ዹ᧕શዶ 放入无菌无酶的 ጶ۪
果蝇饲养参照 ϓᤫ ᤫ ᤫ ϓ 寿命实验方法ᖔ每组 ጢ 管中ᖔ在 ͱऐԡ ቩ 的冰箱中保存ଫ进行 ۪ऊ 扩增并荧
管ᖔ每管 ሕԡ 只ᖔ饲养一定天数后ᖔ每组随机选取 ሕԡ 光定量ᤥ 基因引物见表 ϟᖔᤩᐹᡓʐ၊ϟ 为内参基因ᖔ基因
只果蝇ᖔ分成 ሕ 管ᖔ每管 ϟԡ 只ᤥ 肠道通透性测定参 表达以 ͱ᪵᪵ࣷ ᡙ 值表示ᤥ 实验重复 ሕ 次ྉ每个基因ɯᤥ
照 ᓂᔽ 等 Џϟᤃ 的方法ᖔ将其转移至空瓶中饥饿 ࿗ၤᖔ再 ϓᤫ ጇই 数据处理
喂饲质量分数为 ϟᠮ 的亮蓝ྉጢᠮ 蔗糖ܦϟᠮ 亮蓝ɯ 的 实验数据以平均值 ō 标准差表示ᤥ 采用 ጶዹᔀ
饲料 ϟऐ ၤᤥ 将果蝇用氮气吹晕后ᖔ在光学显微镜下 和 ୩۪୩୩ϟ᥊ ԡ 统计软件ᖔ 运用 ᑕᡱᑕႿ᥋ᥘᔀᔽᔀʢ 检验和
观察每只果蝇的腹部颜色ᖔ当在消化道外可以观察 ᓂᆍ੫᥋ʢᑕႿҴ ᡷᔀ༁ᡷ༁ 分析生存曲线并检验显著性差异ᤥ 其
到染料染色时ᖔ果蝇被称为ᥥ 蓝精灵ɼᤥ 统计蓝精灵 他实验数据采用单因素方差分析检验ᖔ多重分析进
数量ᖔ计算所占果蝇总数的比例ᤥ 实验重复 ሕ 次ᤥ 行组间比较ᤥ 采用 ᨃʢᔽ੫ᔽႿ ԡሕ 软件绘图ᤥ
