Page 62 - 《食品科学技术学报》2020年第5期
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第 38 卷 第 5 期摇 摇 摇 摇 刘摇 伟等: 生物活性多甲氧基黄酮羧酸和氨基酸衍生物的合成及其结构表征                                       5 7


   制抵御癌细胞的影响。 研究也表明,橘皮素在人类
                                                     1摇 实验部分
   肺癌细胞 中 抑 制 诱 导 和 结 构 性 地 表 达 环 氧 酶 2
   (COX鄄2)来发挥抗癌作用         [5]  。
                                                     1郾 1摇 仪器与试剂
       柑橘类果皮提取物中的多甲氧基黄酮物对促炎
                                                         XRC鄄1 型显微熔点仪,北京泰克有限公司;AV鄄
   介质前列腺 E2(PGE2)和一氧化氮含量的抑制作用
                                                     400 型核磁共振仪,德国 Bruker 公司;1100 型液-质
   显著,被视为抗炎成分的主要来源               [6] 。 川陈皮素可以
                                                     联用仪,美国安捷伦科技有限公司;LCQ鄄Advantage
   调节环氧酶 2(COX鄄2)的活动,从而调节基质金属蛋
                                                     型 离 子 阱 质 谱, 赛 默 飞 世 尔 科 技 有 限 公 司;
   白酶(MMP鄄1、MMP鄄3 和 MMP鄄9)和 PGE2 的合成,其
                                                     MAT95XP 型高分辨质谱,美国 Finnigan 公司;薄层
   效果表现为缓解风湿性关节炎的出现                 [7] 。 橘皮素和
   川陈皮素具有较强的抗亚油酸氧化作用。 川陈皮素                           色谱(TLC)和柱层析用硅胶,青岛海洋化工厂。
                                                         实验所用试剂均为分析纯,无水溶剂经去水和
   的抗过氧化和清除羟基自由基的能力最强。 由于
   PMFs 的重要生理功能,美国 Source One 公司已商品                  重蒸处理。
   化生产一种基于柑橘 PMFs 和棕榈果萃取物的保健                         1郾 2摇 实验方法
                                                         以橘皮素和川陈皮素为原料,经过氧丙酮氧化
   品,产品名为 Sytrinol,该产品具强抗氧化性并兼有抗
   炎症效果,该产品全球销售额每年高达数亿美元                     [8]  。  反应、Williamson 反应和羧酸与氨基酸的缩合反应,
       柑橘多甲氧基黄酮类化合物在实际应用中存在                          合成目标化合物,合成路线见图 1。
                                                     1郾 2郾 1摇 3鄄羟基橘皮素(7)和 3鄄羟基川陈皮素(8)的
   水溶性差,生物利用度低的缺点。 若在黄酮引入羧
                                                             合成
   基这种亲水性集团, 可以增加其亲水性,使其容易
   被人体吸收,更容易发挥药效,生物活性提高,应用                               在 1 000 mL 的三口烧瓶中,将橘皮素(500 mg,
                                                     1郾 34 mmol)或川陈皮素 (500 mg, 1郾 2 mmol) 溶于
   范围也得到拓宽。 因此通过化学合成在黄酮结构上
   引入羧基制备黄酮羧酸化合物具有重要应用价                              75 mL V(CH Cl )颐 V(丙酮) = 6颐 5的混合溶剂中,加
                                                                   2
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   值  [9]  。 氨基酸是构成生物体蛋白质最基本的物质,                     入 100 mL 弱碱性缓冲溶液 (Na CO 8郾 0 g,NaHCO          3
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   亲水性强,生物相容性好,在人体内具有重要的生理                           3郾 80 g,水 100 mL),在 0 益 下剧烈搅拌,慢慢加入
   性能, 氨 基 酸 可 以 对 很 多 生 物 活 性 物 质 进 行 修             w = 20% 过硫酸氢钾复合盐的水溶液 70 mL,2 h 滴
   饰  [10] 。 黄酮氨基酸类衍生物是通过在黄酮分子中                      完,在 0 益冰水浴中反应 15 h。 然后再逐滴加入w =
   引入氨基酸对其结构进行合理的修饰和改造,使其                            20% 过硫酸氢钾复合盐的水溶液 70 mL,2 h 滴完,
   水溶性和对肿瘤细胞的选择性和抑制活性增强,更                            在0 益下继续反应 15 h(整个反应过程维持 pH =
                                                     8)。 TLC 追踪至原料点完全消失,停止反应,反应
   容易被肿瘤细胞摄取,同时药物的毒性降低。 Kim
   等  [11] 通过物理化学分析显示,槲皮素谷氨酸衍生物                      液静置分层。 水相用 CH Cl 20 mL 萃取 3 次,将其
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   显著改善了槲皮素的溶解性、稳定性和细胞摄取能                            与有机相合并,加入适量无水 Na SO 对有机相进行
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   力,并证明槲皮素- 氨基酸缀合物是一种安全的多                           干燥。 于滤液中添加 5 mg 对甲苯磺酸,在室温下继
                                                     续搅拌反应 1 h,用紫外灯能观察到反应液的表面有
   药耐药性 ( multiple drug resistance, MDR) 调节剂。
   Song 等  [12]  研究结果显示,白杨素氨基酸类衍生物的                  一层绿色的荧光,减压蒸除反应溶剂,残留物经硅胶
                                                     柱层析分离提纯[洗脱剂为 V(石油醚) 颐 V(乙酸乙
   抗人类肝癌和胃癌细胞的活性比母体白杨素都好。
   另有研究表明,麦黄酮的氨基酸类衍生物可大大提                            酯) = 10颐 1至8颐 1],分别得 3鄄羟基橘皮素淡黄色固
   高其生物利用度        [13] 。                             体 370 mg(产率为 71% )或 3鄄羟基川陈皮素淡黄色
       为了提高多甲氧基黄酮类化合物的水溶性和药                          固体385 mg(产率为 74% )。
   用价值,本研究在查阅大量文献并结合实验室前期                            1郾 2郾 2摇 橘皮素鄄3鄄O鄄乙酸乙酯(9)的合成
   研究工作的基础上,利用橘皮素和川陈皮素作为反                                称取精制的 3鄄羟基橘皮素(500 mg,1郾 29 mmol)
   应原料,以较低的成本、相对简单的方法及较高的产                           和无水碳酸钾(200 mg,1郾 45 mmol),置于 100 mL 圆
   率合成 2 种水溶性的多甲氧基黄酮羧酸衍生物和 4                         底烧瓶中,加入 6 mL N,N鄄二甲基甲酰胺(DMF),将
   种水溶性的多甲氧基黄酮氨基酸衍生物,采用多种                            反应混合物加热在40 益下搅拌反应 0郾 5 h,再缓慢
   分析测试方法对目标化合物进行了结构表征。                              滴加氯乙酸乙酯 (1郾 0 g,8郾 16 mmol),将反应混合物
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