8 - 食品科学技术学报页
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按
Y. enterocolitica
毒力基因携带情况分为
3
个型
别
:A
型
ail
-
、
ystA
-
、
ystB
+
、
virF
-
、
yadA
-
该型仅含有
ystB
基因
,
大部分存在于
1A
生物型的
Y. enterocolit鄄
ica
中
,
通常被认为不致病或致病能力弱
; B
型为
ail
-
、
ystA
-
、
ystB
-
、
virF
-
、
yadA
-
,
该类菌株五种毒
力基因均未检出
,
通常不会对人和动物具有致病性
;
C
型为
ail
+
、
ystA
+
、
ystB
-
、
virF
-
、
yadA
-
仅含两种毒
力基因
,
该型别具有染色体上的两个毒力基因
,
但是
质粒毒力基因丢失
,
不具有完整的致病能力
.
近年
来
,
我们在食品中分离的
Y. enterocolitica
菌株除了
A、B、C
毒力基因型外
,
还分离到菌株为
ail
+
、
ystA
+
、
ystB
-
、
virF
+
、
yadA
+
型别
,
具有染色体上的两个毒力
基因和质粒上的两个毒力基因
,
致病能力强
,
对人和
动物危害大
,
需要警惕
.
将
Y. enterocolitica
按毒力
基因携带情况分为不同的基因型可以很快识别该菌
的致病能力和危害性
,
有助于控制该菌的危害
.
1郾 3摇
小肠结肠炎耶尔森氏菌耐药性
由于抗菌药物的广泛使用
,
细菌耐药性已日益
严重
,
不断出现的多重耐药菌株和新的耐药机制已
成为人类健康面临的重大挑战
.
已有研究发现
Y.
enterocolitica
对氨苄西林和一代头孢类抗生素天然
耐药
,
其机制主要是
Y. enterocolitica
可以产生两种
茁鄄
内酰胺酶
BlaA
和
BlaB
[27]
. BlaA
是超广谱
A
类
酶
,
可以水解多种青霉素类和头孢菌素类抗生素
,
与
青霉素和头孢菌素的耐药均有关
;BlaB
是可诱导的
C
类头孢菌素酶
,
具有很强的头孢菌素酶活性
,
但不
能水解某些青霉素类药物
(
氨苄西林
、
羧苄西林等
)
与头孢菌素的耐药有关
[28]
.
这两种
茁鄄
内酰胺酶的
基因均存在于
Y. enterocolitica
染色体中
,
但在不同
地区或者不同生物型菌株的分布情况和表达水平有
所不同
. 2007
年
,Baumgartner
等
[29]
的研究发现部
分
Y. enterocolitica
对链霉素
、
磺胺类药物
、
氯霉素和
复方新诺明等抗生素耐药
,
也存在少数多重
(
即两
种以上的抗生素
)
耐药的菌株
. 2013
年
,
孙文魁
等
[30]
发现
Y. enterocolitica
对氨苄西林和头孢唑林
的耐药率超过
90% ,
有
71郾 2%
的菌株对
4
种及以上
的抗菌药物耐药
. 2014
年
,Bonardi
等
[31]
对意大利
猪屠宰场分离出的
22
株
Y. enterocolitica
进行耐药
性分析
,
发现所有的
4 / O:3
型菌株均对阿莫西林
、
环丙沙星和头孢他啶耐药
,
而对氨苄青霉素和头孢
噻吩敏感
,91%
的菌株对
3
种以上抗生素耐药
.
这
些研究表明不同地区的
Y. enterocolitica
的抗菌药物
敏感性存在差异
,
存在耐多种抗菌药物的
“
超级
冶
菌
株
,
并且耐药性日益严重
,
需要引起关注
.
近年来
Y. enterocolitica
在临床各类标本中的分离率逐年上
升
,
通过对分离株耐药性进行检测
,
系统建立耐药性
数据库
,
可提高针对性和减少抗生素滥用
,
在临床中
根据
Y. enterocolitica
药敏试验结果选用针对性强的
抗生素
,
可以提高药效
.
2摇
小肠结肠炎耶尔森氏菌分子分型
2郾 1摇
脉冲场凝胶电泳分型
脉冲场凝胶电泳
( pulsed field gel electrophore鄄
sis, PFGE)
分型法可使用于所有细菌
,
被誉为细菌
分子分型的金标准
,
虽然其分辨力
、
重复性等均较
好
,
但这种分型也有许多缺陷
,
还需要不断发展
.
2006
年
,Jin
等
[32]
对分离的
165
株致病性
Y. entero鄄
colitica
的
PFGE
研究表明
,O:3
与
O:9
血清型的主
要带型差异明显
,
亲缘关系较远
,O:3
血清型三个主
要带型聚类相似性很高
,
可能亲缘关系近
,
而
O:9
血清型的主要两个带型差异大可能起源于两个克
隆
. 2007
年
,Maria
等
[33]
从猪的扁桃体中分离的
72
株
Y. enterocolitica
,
主要生物血清型为
4 / O:3,
用
PFGE
分析
,4 / O:3
可以分出
6
个带型
,
其
N1
和
N4
为主要带型
. 2012
年
,
孙文魁等
[34]
对从动物粪便和
肉制品分离的
73
株
1A
生物型
Y. enterocolitica
菌株
用
PFGE
分析研究
,
发现
1A
生物型有很多克隆
,
相
同或相近的聚类簇中
,
均包含不同宿主来源的菌株
,
PFGE
分型与宿主未发现联系
. 2013
年
, Gilpin
等
[35]
通过对
432
株
Y. enterocolitica
用
PFGE
分型研
究发现
,PFGE
对
1A
生物型菌株的分辨率很高
,
分
辨力
DI
为
0郾 997,
然而
PFGE
对生物型
2,3,4
分辨
力很低
,
严重限制其分型效果
,
因此对从爆发的耶尔
森氏菌病中分离的菌株不能用
PFGE
进行溯源
分型
.
2郾 2摇
扩增基因重复序列分型
扩增基因重复序列
( repetitive extragenic palin鄄
dromic / enterobacterial repetitive intergenic consensus鄄
polymerase chain reaction, ( REP / ERIC)鄄PCR)
是通
过扩增细菌染色体的基因重复序列
,
根据其数目及
所在位置不同而产生的一种基因指纹分析方法
.
应
用于革兰阴性菌的基因重复序列主要有两种
:
基因
3
第
32
卷 第
4
期
摇 摇 摇 摇 摇 摇
吴清平等
:
食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌生物学特性和分子分型研究进展
