蛋白酶第
1
小时酶解物
IC50
为
497郾 0 mg / L,Dipro鄄
tin AIC50
为
19郾 71 mg / L。
3摇
结
摇
论
DPP鄄4
抑制剂由于具有特殊的氨基酸组成
、
序
列或者特殊的结构从而可以与
DPP鄄 4
酶活性位点
结合
[20 - 21]
,
进而可以抑制
DPP鄄 4
对内源性
GIP
和
GLP鄄1
的降解
,
延长和提高肠促胰岛素的活性
,
促进
胰岛素分泌
、
降低血糖
。
多肽类物质的
N
端第二位
上有脯氨酸
(Pro)
或丙氨酸
(Ala)
时
,
该多肽就会成
为
DPP鄄4
发挥活性的主要底物
,
如乳源活性肽
Val鄄
Ala、 Ile鄄Pro鄄Ala鄄Val鄄Phe、 Ile鄄Pro鄄Ala鄄Val鄄Phe鄄Lys
均
具有
DPP鄄4
抑制作用
[19,22]
。
本研究发现
,GMP
酶解物的
DPP鄄4
抑制作用优
于
GMP
本身
,
主要由于蛋白酶的作用使含有
64
个
氨基酸的
GMP
肽键断裂产生了具有
DPP鄄4
抑制作
用的肽段
。
其中
,GMP
木瓜蛋白酶酶解物
DPP鄄4
的
抑制作用较好
,
这与木瓜蛋白酶特殊的作用位点有
关
。
木瓜蛋白酶
( 3郾 4郾 22郾 2 )
可裂解碱性氨基酸
(Arg、Lys、His),Leu
或
Gly
的肽键
,
经木瓜蛋白酶酶
解后能产生
N
端第二位上有脯氨酸
(Pro)
或丙氨酸
(Ala)
的多肽
。
Met鄄Ala鄄Ile鄄Pro鄄Pro鄄Lys鄄Lys鄄Asn鄄Gln鄄Asp鄄Lys鄄
Thr鄄Glu鄄Ile鄄Pro鄄Thr鄄Ile鄄Asn鄄Thr鄄Ile鄄Ala鄄Ser鄄Gly鄄Glu鄄
Pro鄄Thr鄄Ser鄄Thr鄄Pro鄄Thr鄄Ile ( Var郾 B ) / Thr ( Var郾 A )鄄
Glu鄄Ala鄄Val鄄Glu鄄Ser鄄Thr鄄Val鄄Ala鄄Thr鄄Leu鄄Glu鄄Ala
( Var郾 B ) / Thr ( Var郾 A)鄄Ser鄄Pro鄄Glu鄄Val鄄Ile鄄Glu鄄Ser鄄
Pro鄄Pro鄄Glu鄄Ile鄄Asn鄄Thr鄄Val鄄Gln鄄Val鄄Thr鄄Ser鄄Thr鄄Ala鄄
Val(GMP
氨基酸序列
,N
端
寅C
端
)。
GMP
经木瓜蛋白酶酶解
1 h
获得的酶解产物对
DPP鄄4
抑制效果较好
,
作为一种乳源活性肽
,
其食用
安全性高
,
作为
DPP鄄4
抑制剂用于糖尿病干预具有
潜在应用价值
。 GMP
酶解产物活性肽段的分离纯
化和氨基酸序列鉴定
,
及其抑制
DPP鄄 4
活性的作用
机制尚待进一步研究
。
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年
3
月
