Page 84 - 《食品科学技术学报》2020年第5期
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第 38 卷 第 5 期摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 李摇 祥等: 黑米花青素对高脂膳食小鼠的空间学习记忆能力的影响                                     7 9


   和蔬菜中    [8] 。 花青素具有较强的清除氧自由基和                     组(normal chow group,NCD)为正常膳食;高脂对照
   抗氧化能力。 近年来,花青素因其对人类的健康作                           组(high fat diet,HFD)为膳食中含 w = 15% 猪油;高
   用,引起了科学家的广泛关注              [9] 。 本研究探讨长期          脂低剂量黑米花青素组(40 mg / kg anthocyanins from
   高脂膳食中添加黑米花青素对小鼠的空间学习记忆                            black rice, LBA) 为 膳 食 中 含 w = 15% 猪 油、 w =
   能力的影响及可能机制,以期为黑米保健食品的开                            40 mg / kg 黑米花青素;高脂高剂量黑米花青素组
                                                     (200 mg / kg anthocyanins from black rice,HBA)为膳
   发提供理论指导。
                                                     食中含 w = 15% 猪油、w = 200 mg / kg 黑米花青素。
   1摇 材料与方法                                          小鼠每笼 4 只,每 7 d 记录 1 次体重,每 2 d 记录 1
                                                     次进食量,定期更换垫料。 各组实验小鼠饲料配方
   1郾 1摇 材料与试剂
                                                     见表 1。
       黑米花青素由天津尖峰天然产物研究院提供,
                                                                表 1摇 4 组小鼠饲喂的饲料组成
   花 青 素 成 分 为 cyanidin鄄3鄄O鄄glucoside ( w =
                                                         Tab. 1摇 Composition of diet for four mice groups摇 g/ kg
   83郾 89% ),cyanidin鄄3,5鄄diglucoside ( w = 3郾 12% ) 和
                                                            饲料成分           NCD    HFD   LBA   HBA
   peonidin鄄3鄄O鄄glucoside (w = 5郾 45% );血清总胆固醇
                                                      w(玉米淀粉)              508    407   407    407
   (total cholesterol,TC) 和甘油三酯(triglyceride,TG)
                                                      w(酪蛋白)               242    242   242    242
   检测试剂盒,均购买于中生北控生物有限公司;小鼠
                                                      w(蔗糖)                119    119   119    119
   去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)酶联免疫检测试
                                                      w(猪油)                 50    150   150    150
   剂盒、小鼠多巴胺(dopamine,DA) 酶联免疫检测试
                                                      w(矿物质混合物)             40     40    40    40
   剂盒和小鼠 5鄄羟色胺(5鄄hydroxytryptamine,5鄄HT)酶
                                                      w(维生素混合物)             20     20    20    20
   联免疫检测试剂盒,均购买于上海生工生物有限公
                                                      w(明胶)                 20     20    20    20
   司;丙二醛(malondialdehyde,MDA) 试剂盒、谷胱甘
                                                      w(蛋氨酸)                 1     1      1     1
   肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH鄄Px) 检测
                                                      w(胆固醇)                 0     1      1     1
   试剂盒、SOD 检测试剂盒,均购买于南京建成生物
                                                      w(黑米花青素)               0     0      0郾 04  0郾 2
   工程研究所。
                                                      w(总蛋白质)              263    263   263    263
   1郾 2摇 仪器与设备
                                                      w(总脂肪)                50    150   150    150
       XR-XM101 型 Morris 水迷宫(配有行为学测试
                                                      w(总碳水化合物)            627    526   526    526
   系统、图像自动监视处理系统和数据处理分析系
                                                      总能量/ kcal           4 010  4 506  4 506  4 506
   统),安徽正华生物仪器设备有限公司;MyiQ2 Real
   Time 型 PCR 仪,美国 BIO鄄RAD 公司;UVmini -1240           1郾 3郾 2摇 Morris 水迷宫实验
   型紫外可见分光光度计,日本岛津公司;SMZ140 型                                      [10]
                                                         采用 Morris    建立的水迷宫实验方法评估小
   酶标仪,厦门麦克奥迪公司。                                     鼠对空间定位的空间学习记忆能力。 小鼠适应环境
   1郾 3摇 实验方法                                        2 d 后进行 MWM 测试,整个测试包括定位航行实验
   1郾 3郾 1摇 动物饲养与分组                                  和空间探索实验两个部分。 定位航行实验测试周期
       SPF 级 4 周龄雄性 C57BL/ 6 小鼠 48 只,体重约             为 5 d,每天在 9:00 ~ 12:00 的时间段将小鼠面向池
   18 g / 只,由北京维通利华实验动物公司提供,动物                       壁依次从 4 个象限的固定位置放入水中,电脑追踪
   饲养符合国家实验动物福利指南及动物实验伦理规                            小鼠寻找隐匿在水下平台所花的时间和游泳路径,
   范。 实验动物生产许可证号:20170930A。                          以小鼠开始寻找到爬到平台的时间为逃避潜伏期。
       饲养条件:标准屏障系统动物房,温度(22 依 2)                     若小鼠在 60 s 内找到隐匿平台,则让其保持在平台
   益,相对湿度 40% ~ 60% ,12 h 昼夜循环,自由进食                  上 10 s;若 60 s 内未能找到隐匿平台,则操作员用小
   及饮水。                                              木棍引导小鼠游至平台并停留 10 s,记录逃避潜伏
       分组:将 48 只小鼠放到标准屏障系统动物房内                       期为 60 s。 小鼠每天训练 3 次,训练间隔为 3 min,
   普通饲料喂养 1 周,使小鼠适应实验环境。 适应期                         记录小鼠逃避潜伏期和游泳距离。 定位巡航实验结
   后将小鼠按照体重,每组 12 只,随机分成 4 组:对照                      束后的第 2 天进行空间探索实验,将隐匿平台移除,
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