Page 85 - 《食品科学技术学报》2020年第5期

8 0 食品科学技术学报摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2020 年 9 月

开始 60 s 的探索实验。 将小鼠从第 1 象限放入水 和记忆能力 [11] 。 对小鼠进行了 5 d 的定位航行实
中,记录小鼠在第 3 象限所花的时间和游泳距离,以 验,得到了 5 d 训练期小鼠的逃避潜伏期和寻找平
及穿越隐匿平台位置的次数。 台的游泳距离,见图 1。 如图 1(a) 所示,随着训练
1郾 3郾 3摇 血清指标的测定 天数的增加,各组小鼠的逃避潜伏期用时均逐渐缩
按照试剂盒的使用操作说明书分别检测小鼠血 短。 在第 5 天时,与 NCD 组比较,HFD 组的航行潜

清 TC、TG 的含量。 伏期显著延长(P < 0郾 05),说明高脂膳食对小鼠的
1郾 3郾 4摇 小鼠海马体中氧化应激指标的测定 学习和记忆能力造成损伤。 然而 HBA 组较 HFD 组
小鼠海马体的 GSH鄄Px、SOD 和 MDA 的测定根 小鼠的逃避潜伏期显著缩短(P < 0郾 05),说明高剂
据试剂盒说明书进行,海马体的蛋白含量采用考马 量黑米花青素可以改善高脂膳食引起的学习和记忆

斯亮蓝法测定。 能力损伤。 在第 5 天的整个测试期间,HFD 组、LBA
1郾 3郾 5摇 小鼠海马体中单胺类神经递质含量的测定 组和 HBA 组 小 鼠 游 泳 距 离 均 明 显 长 于 NCD 组
小鼠海马体中 NE、DA 和 5鄄HT 这 3 种单胺类 (P < 0郾 05),而 HBA 组小鼠的游泳距离显著小于
神经递质水平分别按照 ELISA 试剂盒定量分析方 HFD 组(P < 0郾 05),见图 1(b),说明黑米花青素改
法进行测定。 善了高脂膳食小鼠的空间学习记忆能力后可以有效
1郾 3郾 6摇 小鼠大脑组织中炎症相关因子基因的 mRNA 地改善其寻找平台的模式。
表达水平测定
用 Trizol 法 [8] 提取脑组织中总 RNA,用随机引
物将 RNA 反转录成 cDNA。 根据基因序列设计特
异性引物,通过 qPCR 的方法,使用 SYBR GREEN
染料法,以 GAPDH 为内参基因,做相对定量检测小
鼠大脑组织的 TNF琢、COX鄄2、IL鄄1茁 基因表达水平。
实验中所用引物见表 2。
表 2摇 qPCR 引物序列

Tab. 2摇 qPCR primers sequence
基因名称 引物
F:5忆TGGTGAAGGTCGGTGTGAAC3忆
GAPDH
R:5忆AACAATCTCCACTTTGCCACTG3忆
F:5忆CGTGGAACTGGCAGAAGAG3忆
TNF琢
R:5忆GGAATGAGAAGAGGCTGAGAC3忆
F:5忆ATCATCTCGCTAATACTAACAAC3忆
COX鄄2
R:5忆TCAACTTCTAGCAGTCGTAGTT3忆
F:5忆GCTACCTGTGTCTTTCCCGT3忆
IL鄄1茁
R:5忆CGTCACACACCAGCAGGTTA3忆
不同字母表示存在显著性差异(P < 0郾 05)。
1郾 4摇 数据统计 图 1摇 小鼠水迷宫定位航行实验结果
使用 Graphpad Prism 5郾 01 软件统计,通过单因 Fig. 1摇 Navigation test of mice in Morris water maze
素 ANOVA 分析数据,然后进行 Tukey 多重比较进 摇
在定位航行实验结束的第 2 天移走平台,进行
行方差分析及显著性检验,标注不同字母表示存在
空间探索实验,测定小鼠在 60 s 内停留在第 3 象限
显著性差异(P < 0郾 05)。
的时间和运动距离,以及穿越平台的次数,如图 2。
2摇 结果与分析 HFD 组小鼠在原隐蔽平台象限区(第 3 象限) 所花
费的时间和路径较 NCD 组小鼠明显减少。 而经过
2郾 1摇 黑米花青素对小鼠 Morris 水迷宫表现的影响 黑米花青素干预的小鼠,尤其是 HBA 组小鼠在第 3
MWM 测试常被用来评估小鼠空间定位的学习 象限 的 时 间 和 路 径 较 HFD 组 均 明 显 延 长 ( P <