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第 36 卷 第 2 期摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 曹永强等: 一株嗜热链球菌乳糖酶的分离纯化及酶学特性研究 4 9

活性又逐渐降低。 说明 pH 值过高或者过低都会降 对酶活性几乎没有抑制作用,琢 乳糖对乳糖酶有一
低酶的活性,st. GST鄄6 产乳糖酶的最适 pH 值为 6。 定的抑制作用,而 SDS 对乳糖酶的活性有较强的抑
制作用。
2郾 4郾 8摇 乳糖酶的动力学性质

底物浓度的倒数与酶活的倒数关系如图 21。
利用双倒数法求米氏常数,直线在 X 轴的截距为
- 1 / K,在 Y 轴的截距为 1 / V ,由方程可得,最大速
max
度 V = 2郾 20 滋mol/ min,K = 0郾 27 mmol/ L。
max m

图 18摇 pH 值对乳糖酶活性的影响
Fig. 18摇 Effects of pH values on enzyme activity
2郾 4郾 6摇 不同浓度金属离子对乳糖酶活性的影响
金属离子对酶活性的影响主要为激活作用和抑
制作用,不同浓度金属离子对乳糖酶活性影响如图
19。 锰离子、镁离子和亚铁离子均对酶起到激活作
用,并且随浓度升高,激活作用也增强;钙离子、铜离
子、锌离子对酶起到抑制作用,并且基本上随浓度升
图 21摇 底物浓度倒数与酶活性倒数关系
高,抑制作用减弱。 其中,锰离子的激活作用最强,
Fig. 21摇 Lineweaver鄄Burk plot of lactase using ONPG
铜离子的抑制作用最强。
as substrate
3摇 结摇 论

培养基中提供微生物生长所需的营养要素对其
产酶具有重要影响。 碳源能提供微生物生长所需的
能量,同时某些碳源还是酶的诱导物,碳源种类会影
响乳糖酶的产量 [17] 。 st. GST鄄6 产乳糖酶的最适碳
源为乳糖,这可能因为乳糖酶是一种胞内酶,它的合
成需要诱导物质来完成。 乳糖浓度的高低影响到乳
糖酶的产量,乳糖浓度超过最适浓度时,由于打破了
图 19摇 金属离子浓度对乳糖酶活性的影响 适合微生物生长的 C / N,菌株生长缓慢,乳糖酶的产
Fig. 19摇 Effects of various metal ions on enzyme activity 生受到抑制,导致酶产量下降 [18 - 19] 。 氮源作为构成
2郾 4郾 7摇 不同抑制剂对乳糖酶活性的影响 生物体的蛋白质、核酸及其他氮素化合物的材料,大
不同抑制剂对乳糖酶活性影响如图 20。 EDTA 豆蛋白胨的添加量会影响乳糖酶的产量,这可能是
大豆蛋白胨容易被 st. GST鄄6 利用导致的。 金属离
子种类能影响乳糖酶的产量,钙离子可促进菌株产
酶,与钙离子对乳糖酶合成途径相关酶的激活作用
有关 [20] 。 发酵温度会影响酶促反应的速率,在最佳
温度下,菌株产酶的反应处于最佳条件,当温度更高
时,酶失去活性发生不可逆反应,导致产乳糖酶活性
降低 [21] 。 培养基初始 pH 值在产酶过程中会不断
变化 [22] ,本研究对培养基初始 pH 值的研究表明其
图 20摇 抑制剂对乳糖酶活性的影响 对菌株产酶也有较大影响。
Fig. 20摇 Effects of inhibitors on enzyme activity
利用硫酸铵分级沉淀,当其饱和度为 10% 时可