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4 8 食品科学技术学报摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2018 年 3 月

测酶活性,透析冷冻干燥后得到较纯的乳糖酶。

图 13摇 培养基初始 pH 值和接种量对乳糖酶活性
图 16摇 SepHadex G75 柱洗脱峰
影响响应面图
Fig. 16摇 Chromatogram of lactase by SepHadex G75
Fig.13摇 Response surface and contour plots for effects of initial
2郾 4郾 4摇 不同温度对乳糖酶活性的影响
pH values and inoculation on lactase production
不同温度对乳糖酶的活性有很大影响( 见图
17)。 由图 17(a)可以看出,酶活性随温度上升而增
高,当温度达到 70 益 时,酶具有最大活力,表明 st.
GST鄄6 产乳糖酶在高温下仍具有很高的活力。 乳糖
酶在不同温度的热稳定性如图 17(b),酶的热稳定
性随温度升高而降低,其中在 30 ~ 40 益时酶的活性
最大,保留了 70% 的活性,在 50 ~ 60 益 酶热稳定性
图 14摇 硫酸铵沉淀上清液中乳糖酶酶活力变化曲线 下降趋势加快。 故 st郾 GST鄄6 产乳糖酶具有耐高温
Fig. 14摇 Enzyme activity in supernatant after various 的能力,但是持续时间较短,在应用过程中需要注意
(NH ) SO saturation precipitation 保温时间。
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2郾 4郾 2摇 DEAE鄄SepHarose Fast Flow 纯化结果
使用 DEAE鄄SepHarose Fast Flow 离子交换柱纯
化乳糖酶的结果如图 15,纯化过程出现 4 个峰。 收
集每个峰检测酶活性发现峰 3 具有乳糖酶活性,而
其他峰的酶活性显著低于峰 3,收集峰 3 进行透析
冷冻干燥。

图 15摇 DEAE鄄SepHarose Fast Flow 离子交换柱洗脱峰 图 17摇 温度对乳糖酶活性的影响
Fig. 15摇 Chromatogram of lactase by DEAE鄄SepHarose
Fig. 17摇 Effects of temperatures on enzyme activity
Fast Flow 2郾 4郾 5摇 pH 值对乳糖酶活性的影响
摇
2郾 4郾 3摇 SepHadex G75 纯化结果分析 pH 值对乳糖酶活性的影响如图 18。 pH 值为
使用 SepHadex G75 层析柱纯化乳糖酶的结果如 3 ~ 4 时,酶的活性较低;在 5 ~ 6 时,酶的活性很高,
图 16,纯化过程出现 1 个峰。 收集峰附近洗脱液可检 并保留了 80% 以上的活性;当 pH 值高于 6 时,酶的