常温酸奶是乳制品中增长势头迅猛的细分行业，潜力巨大[1]。常见纸盒钻石包装产品易发生变形破损，高密度聚乙烯瓶装常温酸奶作为新型包装酸奶，能有效避免纸盒钻石包装自身局限性。市售钻石盒装常温酸奶采用75 ℃，30 s杀菌后进行灌装，本研究采用高密度聚乙烯瓶灌装酸奶后，从3个温度水平(6、75、95 ℃)、三个时间水平(15、20、25 min)对产品进行二次杀菌，对研究的可行性和最优参数进行选取，并对产品在保质期内的酸度、黏度和微生物限量检测及感官品评结果进行了研究。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

生乳，河北完达山贝兰德乳业有限公司；高密度聚乙烯瓶，沧县纪勇塑料制品有限公司；云龙牌白砂糖，云南德宏力量生物制品有限公司；菌种：嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌，俄罗斯Zelenye Linii公司；乳酸菌，法国BIOPROX公司。

稳定剂：羧甲基纤维素钠、黄原胶、果胶、柠檬酸钠、琼脂，北京颐和村科技有限公司第一分公司；结晶紫中性红胆盐琼脂、孟加拉红琼脂，北京陆桥技术股份有限公司；MC培养基、MRS培养基，北京陆桥技术股份有限公司；NaOH，分析纯，天津市大茂化学试剂厂；纯净水，杭州娃哈哈百立食品有限公司。

1.2 仪器与设备

DL-CJ-2ND I型洁净工作台，北京东联哈尔仪器制造有限公司；DHP-9162 型电热恒温培养箱，上海一恒科学仪器有限公司；PL4002 型电子天平，梅特勒-托利多仪器(上海有限公司)；HW.SY21-KPB型电子恒温不锈钢水浴锅，北京长风仪器仪表公司；BXM-50VE型立式压力蒸汽灭菌器，上海博讯医疗实业有限公司；SF-400型灌装封口机、SSL-401型连续式淋水杀菌机，杭州永创智能设备股份有限公司；DV-Ⅱ+型黏度计，美国Brookfield公司。

1.3 实验方法

高密度聚乙烯瓶装常温酸奶加工工艺流程。

生牛乳→净乳→预巴杀(75 ℃、15 s)→标准化→配料→均质(20 MPa)→杀菌((95±2) ℃、300 s)→接种( 涉及企业配方，略去)→恒温发酵((43±1) ℃、6 h)→待装→灌装封口→二次杀菌→冷却→检验→入库。

1.3.1 二次杀菌工艺优化设计方法

杀菌温度过低时不能杀灭酸奶中的所有微生物，在贮存过程中微生物繁殖导致产品变酸或涨包，品质下降；温度过高时酸奶蛋白出现变性，口感较粗糙，析水较多[2]。在大量实验基础上，按照L9(34)正交表，对杀菌温度和时间进行两因素三水平的正交试验[3]，A因素设为二次杀菌温度(℃)，B因素设为二次杀菌时间(min)。根据酸奶产品特性，从微生物限量测定、感官指标，黏度确定选取优化工艺条件，试验因素水平见表1。

表1 L9(34)正交试验因素水平

Tab.1 Factors and levels of L9(34) orthogonal test

水平因素二次杀菌温度/℃二次杀菌时间/min165152752039525

1.3.2 感官品评方法

邀请8名有乳制品品评经验的人员组成评定小组，从色泽、滋气味、组织状态、酸甜比、厚薄感五个感官指标要求进行品评，品评标准如表2。

1.3.3 各指标测定方法

1)黏度测定。在(20±1)℃环境下，用黏度仪(S63号转子、20 r/min)测定样品的黏度，重复测定3次，取平均值。

2)酸度测定。依据GB 5009.239—2016[4]方法检验执行。

表2 感官品评标准

Tab.2 Sensory evaluation standard

项目(评分)因素良好可接受不可接受色泽(2分)210滋气味(2分)210组织状态(2分)210酸甜比(2分)210厚薄感(2分)210

3)大肠菌群测定。依据GB 4789.3—2016[5]方法检验执行。

4)霉菌、酵母菌测定。依据GB 4789.15—2016[6]方法检验执行。

5)乳酸菌测定。依据GB 4789.35—2016[7]方法检验执行。

高密度聚乙烯瓶装常温酸奶为发酵后热处理产品，GB 19302—2010对乳酸菌数不作要求，故该指标仅为优化工艺提供参考，不作为本实验的判定依据。

2 结果与分析

2.1 正交试验结果及分析

不同二次杀菌温度和时间的正交试验结果见表3。由表3可知，高密度聚乙烯瓶装常温酸奶正交试验各个参数对中，微生物限量检测结果：大肠菌群、霉菌、酵母菌的检测结果均小于1 CFU/mL，可以保证产品在货架期内不变质[8]。

表3 正交试验结果

Tab.3 Results of orthogonal test

试验序号二次杀菌温度/℃二次杀菌时间/min感官品评黏度/(mPa·s)大肠菌群浓度/(CFU·mL-1)霉菌浓度/(CFU·mL-1)酵母菌浓度/(CFU·mL-1)16515732745<1<1<126520752876<1<1<136525712679<1<1<147515772892<1<1<157520752868<1<1<167525732728<1<1<179515652685<1<1<189520652591<1<1<199525642487<1<1<1

图1 感官品评直观分析结果
Fig.1 Analysis diagram of sensory evaluation

使用Minitab16软件对二次杀菌参数所得的感官品评及黏度数据进行处理，得到直观分析图，如图1。由图1可以得出，二次杀菌温度在第二个水平时，产品的感官品评、黏度测定是最好的；二次杀菌时间在第一个水平、第二个水平时，产品的感官品评、黏度测定相差不大，都是最优的，所以二次杀菌温度对产品的影响优先考虑。

分别对两个因素(二次杀菌温度、二次杀菌时间)的三个水平计算感官品评、黏度测定的平均值，可得表4、表5。利用极差分析可得出，温度对高密度聚乙烯瓶装常温酸奶感官品评(极差R=10.33)、产品黏度(极差R=241.67)影响较大；时间对高密度聚乙烯瓶装常温酸奶感官品评(极差R=2.34)、产品黏度(极差R=147.00)影响较小。感官品评比较满意水平为A2B1(或A2B2)；黏度测定比较满意水平为A2B2。因此，高密度聚乙烯瓶装常温酸奶优化工艺条件选定为：75 ℃，20 min。

表4 感官品评正交试验分析结果

Tab.4 Results of orthogonal test for sensory evaluation

感官品评水平1水平2水平3R排序二次杀菌温度73.0075.0064.6710.331二次杀菌时间71.6771.6769.332.342

为验证结果准确性，选用Minitab16软件中方差型分析(一般线性模型)对不同热处理条件下的感官品评和黏度测定结果进行分析，结果见表6、 表7。由表6、表7可以得出，二次杀菌温度对酸奶感官品评的影响达到极显著水平(p<0.01)、对黏度测定的影响达到显著水平(0.01<p<0.05)，二次杀菌时间对酸奶感官品评、黏度测定的影响不显著(p>0.05)。

2.2 常温酸奶贮存实验及分析

将高密度聚乙烯瓶装常温酸奶与空白样品(空白样品是同批次产品，灌装完毕后，未经任何杀菌处理)放在(20±1)℃避光环境下，每隔10 d测定酸度、黏度变化。普通酸奶保质期一般在20～30 d，待样品检测至40 d时，不再对空白样品进行测定。酸度测定结果如图2，黏度测定结果如图3。

表5 黏度测定正交试验分析结果

Tab.5 Results of orthogonal test for viscosity measurement

黏度/(mPa·s)水平1水平2水平3R排序二次杀菌温度2766.672829.332587.67241.671二次杀菌时间2774.002778.332631.33147.002

表6 二次杀菌参数对感官品评方差分析

Tab.6 Variance analysis of effects of secondary sterilization on sensory evaluation

来源自由度方差均方差Fp二次杀菌温度2180.22290.11162.380.001二次杀菌时间210.8895.4443.770.120误差45.7781.444合计8196.889

表7 二次杀菌参数对黏度测定方差分析

Tab.7 Variance analysis of effects of secondary sterilization on viscosity measurement

来源自由度方差均方差Fp二次杀菌温度2943714718514.050.016二次杀菌时间241982209916.250.059误差4134363359合计8149789

图2 酸度随时间变化情况
Fig.2 Changes of acidity over time

图3 黏度随时间变化情况
Fig.3 Changes of viscosity over time

酸度的变化是酸奶在贮藏中发生变质的主要表现[9]，通过图2可以看出，高密度聚乙烯瓶装常温酸奶后期酸度增长较为缓慢，且随时间增加，酸度增长变得更慢。在前30 d，酸度增长4°T；在30～60 d，增长2°T；在60～90 d，增长2°T。与高密度聚乙烯瓶装酸奶相比，普通酸奶酸度增长迅速，在30 d内增加41°T。高密度聚乙烯瓶装常温酸奶产品后酸化较为缓慢，可以延长货架期，如降低外界环境温度，保鲜期可望得到有效延长[10]。

酸奶的黏度是搅拌型酸奶生产中非常重要的指标，是评价一款酸奶质量好坏的关键因素[11]。由图3可见，普通酸奶和高密度聚乙烯瓶装常温酸奶在贮存过程黏度都呈下降趋势，而高密度聚乙烯瓶装常温酸奶后期黏度随时间增加，降低速度减慢。在前30 d，黏度降低了183 mPa·s；在30～60 d，降低89 mPa·s；在60～90 d，降低298 mPa·s。普通酸奶黏度降低迅速，在30 d内降低1 632 mPa·s 。高密度聚乙烯瓶装常温酸奶产品黏度变化较为缓慢，可以延长货架期，保证口感纯厚。由于受工厂实际生产的限制,很多因素尚未在文中涉及，还需进一步研究[12]。

分别对在室温下放置1、30、60、90 d产品的大肠菌群、霉菌和酵母菌浓度进行检测，均小于1 CFU/mL，满足GB19302关于微生物限量要求。该产品是灌装后二次杀菌，微生物的杀灭受酸奶的pH值和加热条件的双重效果影响[13]。

酸奶的香气和风味主要源于非挥发性酸、挥发性酸和羰基化合物，醇类和酯类也对风味有影响[14]。产品在保存30、60、90 d时，分别按照1.3.2方法进行感官品评，结果如表8。由表8可见，产品在30，60 d时，感官品评结果良好，90 d时，感官品评结果基本无变化，口感略显稀薄。

表8 贮存实验样品感官品评结果

Tab.8 Sensory evaluation of storage test

项目(得分)品评得分明细30d60d90d色泽(2分)161616滋气味(2分)151514组织状态(2分)161615酸甜比(2分)151414厚薄感(2分)131311

苗君莅等[15]也从理论数据证明了长保质期酸奶经历了二次巴氏杀菌后体系的稳定性良好，保质期内风味物质损失小、变化少，感官品评可以接受。

3 结 论

1)高密度聚乙烯瓶装常温酸奶在3个温度水平(65、75、95 ℃)、3个时间水平(15、20、25 min)组合的二次杀菌参数，都可以达到国家标准，对杀菌参数采用L9(34)正交试验，综合微生物检测限量、感官品评和产品黏度测定考虑，优化获得二次杀菌工艺参数为75 ℃，20 min。

2)对采用优化工艺后产品的存储时间进行验证，通过对产品酸度、黏度、微生物限量检测、感官品评4个方面测定，产品在保存90 d时，均满足食品安全要求，在消费者口感可接受范围内。

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Study on Technology of Room Temperature Yogurt in HDPE Bottles

ZHANG Jianke1， GONG Min1， DU Tianning2， CHEN Chao2， WANG Su1， LU Xiaoyuan3， LI Kaihui1

(1.Hebei Wondersun Bayland Dairy Co Ltd, Xingtai 055350,China； 2.Jinmailang Drinks Stock Co Ltd, Xingtai 055350, China； 3.Beijing Continental Hengtong Certification Co Ltd, Beijing 100068, China)

Abstract： The cartons diamond packaging market becomes more and more popular, but carton products by their own limitations (such as going out to carry, improper preservation, etc.) is prone to the deformation and damage. To enhance the image of the terminal product,and provide consumers with more convenient products, high density polyethylene (HDPE ) bottles for yogurt at room temperature were studied. In this study, the feasibility and optimal parameters of the secondary sterilization of the room temperature yoghurt in high density polyethylene bottle were studied. The sensory evaluation, viscosity, and microbial test results of the yogurt were determined by the L9(34) orthogonal test with the temperature and time as factors. The results showed that the optimal parameter for HDPE bottled yogurt was the 75 ℃, 20 min secondary sterilization and the shelf-life of yogurt was 90 days.

Keywords： HDPE; room temperature yogurt; secondary sterilization; storage test; shelf life

中图分类号： TS206.2； TS252.54

文献标志码：A

收稿日期： 2017-12-05

作者简介： 张建科，男，工程师，主要从事食品加工方面的研究与开发工作。

doi:10.3969/j.issn.2095-6002.2018.05.016

文章编号：2095-6002(2018)05-0106-05

引用格式：张建科，巩民，杜甜宁，等. 高密度聚乙烯瓶装常温酸奶加工技术研究[J]. 食品科学技术学报，2018,36(5):106-110.

ZHANG Jianke， GONG Min， DU Tianning， et al. Study on technology of room temperature yogurt in HDPE bottles[J]. Journal of Food Science and Technology, 2018,36(5):106-110.

(责任编辑：叶红波)